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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大量收集木霉孢子的方法
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gr0826

新虫 (初入文坛)

[求助] 大量收集木霉孢子的方法 已有1人参与

我想用PDA平板培养，然后加无菌水冲洗的方法，因为没做过，想知道具体的操作步骤是什么样的，加多少无菌水？如何冲洗？冲洗完的液体如何处理，还是就那样就行了。。。还有这个液体的保存条件~计数的话是不是用血球计数板就可以了，还是有更好的方法~谢谢~
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1楼 2013-07-04 16:41:28
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虫儿7893

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

每个平板加8-10mL无菌水（因为平板培养到长孢子水分会少很多），用涂布棒（灼烧灭菌）轻轻涂布，孢子就洗下来了。用枪头吹洗的缺点是会产生很多气泡，不好操作，容易染菌。
冲下来的孢子悬液放4度冰箱，用几天还是没问题的。
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5楼2014-07-23 10:19:51
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖应助 2013-07-23 17:12:28
无菌水2～6mL;冲洗完的液体用移液管（枪）吸；短期保存放4度（长期没保过，应该甘油管放超低温吧）；血球计数板可以的。
具体的操作步骤怎么操作都行，只要注意不要染菌。。。
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工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
2楼2013-07-07 09:08:18
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myindexaust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖应助 2013-07-23 17:12:54
建议可以用斜面PDA培养基，待孢子长满斜面后，加水，然后涡旋振荡，可以充分洗出斜面上的孢子。注意两点：
1）放水的多少根据斜面培养基试管的大小，放水以可没过斜面且利于计数为准，可做预实验摸索；
2）如要充分洗出孢子，可加水重复几次，到洗出液没有孢子为止。
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3楼2013-07-23 15:51:54
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aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可在斜面直接加15-20%甘油洗下孢子，如果要更准确计数的话，还是建议用平板计数（混平板法）。粗略计数用血球板就行了。
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汇天下之贤
4楼2013-07-24 08:48:43
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