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xueyutianj新虫 (小有名气)
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[求助]
求助荧光纳米颗粒标记免疫分析实验 谢谢
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各位大牛好，新手求助。 最近在做一个纳米颗粒偶联的荧光二抗，纳米颗粒上标记荧光分子是FITC, 想用酶联免疫吸附的方法验证这个荧光二抗的性能及检测下限，用的是全黑的荧光酶标板，问题是，每次做完直接用紫外灯照的话一点荧光都看不见，我们实验室也没有能测96孔板荧光的设备，所以没扫过荧光，只是拿紫外灯照了看，不过啥荧光也看不出来，我想拿到类似于文献中的图（见下）可不知道文献里的图是用什么设备或者什么方法做出来的，这个也许太基本了，文献里也没有详细的这方面过程说明。求有经验的指导。新手完全不会，实验室是做化学的，也完全没这方面基础。  未命名.jpg |
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凌波丽
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4楼2013-06-29 12:45:17
凌波丽
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【答案】应助回帖
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不同的荧光基团的激发波长并不相同。你是做小分子荧光标记，还是做荧光量子点？你应该不是做荧光量子点吧，因为荧光量子点核心的过渡态尽数本身就可以激发荧光，不用再偶联上荧光分子FITC。当然两者的纳米颗粒（假设你的纳米颗粒也是金属颗粒）的共价链接的原理差不多。 楼主能不能说说你的纳米颗粒是什么？是纳米金吗？你的实验目的是什么？不然我们没有办法讨论下去。 |
2楼2013-06-29 00:14:43
myprayer
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【答案】应助回帖
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这本书可能对楼主有用，关于荧光技术介绍的很全面，特别适合跨专业多学科交叉的新手学习，啃读。在论坛里面能直接下载到到的 下载链接为 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1923202 书名：细胞生物学荧光技术原理和应用 作者：刘爱平 出版社：中国科学技术大学出版社，2007 页数：320页 前言 第一部分 基本知识 第一章 光的基本知识 第二章 荧光的基本知识 第一节 荧光的发光原理 第二节 荧光色素的性质 第三节 组织细胞的自发荧光与继发荧光 第四节 荧光的淬灭及抗淬灭 第五节 荧光光谱交叉干扰及消除 第三章 荧光染料(色素)的早期应用和发展史 第四章 常用的荧光染料(探针) 第一节 细胞器荧光探针 第二节 细胞骨架荧光探针 第三节 研究钙调节及活性的荧光探针 第四节 核酸荧光探针 第五节 其他荧光探针 第五章 活体荧光材料——绿色荧光蛋白(GFP)及其衍生物 第六章 最新型荧光材料——量子点 第二部分 荧光色素(探针)在细胞生物学中的应用 第七章 荧光技术在细胞生物学中的应用 第一节 细胸凋亡及其基本通路 第二节 荧光显微镜对细胞凋亡的形态学观察 第三节 凋亡调控分子的荧光标记在细胞凋亡研究中的应用 第四节 其他荧光技术在细胞凋亡研究中的应用 第八章 流式细胞技术在细胞生物学中的应用 第一节 检测细胞的特征 第二节 检测细胞的增殖和凋亡状态 第三节 定量检测可溶性蛋白质(CBA技术) 第四节 纯化特定的细胞 第九章 荧光在细胞骨架研究中的应用 第一节 荧光技术在微丝骨架研究中的应用 …… 第十章 荧光原位杂交 第十一章 荧光在GER2/ErbB2/p185研究中的应用 第十二章 绿色荧光 第十三章 免疫荧光细胞化学技术 第三部分 常用荧光检测仪器 第十四章 生物荧光显微镜 第十五章 激光扫描共聚焦显微镜 第十六章 活细胞显微成像技术 第十七章 活体体内荧光成像技术 第十八章 流式细胞质仪 第十九章 荧光定量PCR仪 第二十章 荧光分光光度计 第二十一章 激光扫描成像仪 附录 免疫细胞化学常用试剂及其配制方法  细胞生物学荧光技术原理和应用.png [ Last edited by myprayer on 2013-6-29 at 12:41 ] |
3楼2013-06-29 12:38:05
xueyutianj
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5楼2013-06-29 20:07:50
