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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大神们帮我看看刚跑完的胶
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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)

[求助] 大神们帮我看看刚跑完的胶

两边的亮带是2000的marker，中间四条是pcr产物，，，，左边的marker是什么问题啊? 为什么胶孔周围这么模糊啊？？
大神们帮我看看刚跑完的胶
130624e.jpg

[ Last edited by 1949stone on 2013-6-25 at 15:06 ]
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1楼 2013-06-25 09:59:36
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回帖置顶 ( 共有1个 )

20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+2, 推荐 2013-06-25 15:05:21
1949stone: 回帖置顶 2013-06-25 15:05:23
你需要确认一下:
   1:你制的胶放置了多长时间，如果时间过长的话可能会出现上面的情况
  2：你制胶的时候板子上有水
  3：你的样品里面的蛋白质含量太高
  4：制的胶没有混匀
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8楼2013-06-25 14:57:17
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普通回帖

137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-25 10:31:46
第一、模板浓度有可能过高，可以适当减少模板浓度。
第二、做琼脂糖胶的技术需要练习一下，特别要主要梳子下面不要有异物~~
实验顺利~
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总有一天我要修改用户名。
2楼2013-06-25 10:02:15
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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 137167741 at 2013-06-25 10:02:15
第一、模板浓度有可能过高，可以适当减少模板浓度。
第二、做琼脂糖胶的技术需要练习一下，特别要主要梳子下面不要有异物~~
实验顺利~

嗯 谢谢你   四个模版浓度 大约为30,60,90 90ng，，，，，这样会高吗？梳子里面没有杂物的，，
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3楼2013-06-25 10:20:43
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模版的浓度要根据物种确定。pcr酶说明书上应该有的，胶最好别切，切了后会条带斜，点样量5ul吧
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4楼2013-06-25 10:41:15
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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-06-25 10:41:15
模版的浓度要根据物种确定。pcr酶说明书上应该有的，胶最好别切，切了后会条带斜，点样量5ul吧

5ul的话浓度会不会太大？
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5楼2013-06-25 11:39:04
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-25 15:05:09
不会吧，一般mark上5ul，最亮的条带200ng。。可以的
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6楼2013-06-25 13:58:19
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rv1nm2y

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉点样处和点样技术有关啊，上次两个不同的人点样，一个点样孔一点杂蛋白都没有，另外一个就全部都是样了，好好练习一下吧，~
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7楼2013-06-25 14:18:59
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