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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)

[求助] 大神们帮我看看刚跑完的胶

两边的亮带是2000的marker,中间四条是pcr产物,,,,左边的marker是什么问题啊? 为什么胶孔周围这么模糊啊??
大神们帮我看看刚跑完的胶
130624e.jpg

[ Last edited by 1949stone on 2013-6-25 at 15:06 ]
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-25 10:31:46
第一、模板浓度有可能过高,可以适当减少模板浓度。
第二、做琼脂糖胶的技术需要练习一下,特别要主要梳子下面不要有异物~~
实验顺利~
总有一天我要修改用户名。
2楼2013-06-25 10:02:15
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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 137167741 at 2013-06-25 10:02:15
第一、模板浓度有可能过高,可以适当减少模板浓度。
第二、做琼脂糖胶的技术需要练习一下,特别要主要梳子下面不要有异物~~
实验顺利~

嗯 谢谢你   四个模版浓度 大约为30,60,90 90ng,,,,,这样会高吗?梳子里面没有杂物的,,
3楼2013-06-25 10:20:43
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
模版的浓度要根据物种确定。pcr酶说明书上应该有的,胶最好别切,切了后会条带斜,点样量5ul吧
4楼2013-06-25 10:41:15
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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-06-25 10:41:15
模版的浓度要根据物种确定。pcr酶说明书上应该有的,胶最好别切,切了后会条带斜,点样量5ul吧

5ul的话浓度会不会太大?
5楼2013-06-25 11:39:04
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-25 15:05:09
不会吧,一般mark上5ul,最亮的条带200ng。。可以的
6楼2013-06-25 13:58:19
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rv1nm2y

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉点样处和点样技术有关啊,上次两个不同的人点样,一个点样孔一点杂蛋白都没有,另外一个就全部都是样了,好好练习一下吧,~
7楼2013-06-25 14:18:59
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+2, 推荐 2013-06-25 15:05:21
1949stone: 回帖置顶 2013-06-25 15:05:23
你需要确认一下:
   1:你制的胶放置了多长时间,如果时间过长的话可能会出现上面的情况
  2:你制胶的时候板子上有水
  3:你的样品里面的蛋白质含量太高
  4:制的胶没有混匀
8楼2013-06-25 14:57:17
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