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bradyluo

新虫 (小有名气)

[求助] 求大神帮我分析下胶带~

我提取的细菌的DNA，我用的marker Ⅲ，最大分子量是4500，有些条带木有很明显的片段，但是有一个片段在4500以上又特别明显！这是为什么啊~

2012.12.13 DNA3.jpg
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1楼 2012-12-13 23:04:43
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枫叶丹

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bradyluo: 金币+2, ★有帮助 2012-12-26 14:22:15
你提的是细菌总的DNA吗，那就在5000左右吧
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2楼2012-12-14 09:04:43
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55晴朗天天

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bradyluo: 金币+2 2012-12-26 14:23:34
我提细菌DNA一般用15000的maker  你的条带显示的应该是高于4500  换大点的maker再跑一遍试试
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有梦就有希望！想就有可能！
3楼2012-12-14 10:52:28
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lidanye

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励应助和交流！ 2012-12-15 13:48:22
bradyluo: 金币+1 2012-12-26 14:24:42
个人经验，细菌基因组提的不错的时候往往能拿到10kb以上大概20kb左右的条带；如果下面有很多smear就说明DNA降解断裂得比较厉害；lz这胶看着不是很清晰，貌似最后几个样品可能还有点RNA没除掉，在最低的marker条带下面的地方看到一些较浓重的smear
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4楼2012-12-14 23:04:54
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bradyluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 枫叶丹 at 2012-12-14 09:04:43
你提的是细菌总的DNA吗，那就在5000左右吧

其实我就想知道我的DNA是不是太大了有问题，师兄说我的提取的DNA分子量太大~
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5楼2012-12-26 14:22:42
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bradyluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 55晴朗天天 at 2012-12-14 10:52:28
我提细菌DNA一般用15000的maker  你的条带显示的应该是高于4500  换大点的maker再跑一遍试试

有这么大的marker啊？什么marker啊？
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6楼2012-12-26 14:23:30
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bradyluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lidanye at 2012-12-14 23:04:54
个人经验，细菌基因组提的不错的时候往往能拿到10kb以上大概20kb左右的条带；如果下面有很多smear就说明DNA降解断裂得比较厉害；lz这胶看着不是很清晰，貌似最后几个样品可能还有点RNA没除掉，在最低的marker条带下 ...

不清晰可能是照胶的时候被污染了啊，我用DNA试剂盒怎么会有RNA呢？
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7楼2012-12-26 14:24:39
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

我一般用1W的Marker,一般都还在1W上面一点，你Marker换个大点的吧，还有这个胶配得真不干净，也不知道是拍照背景的问题还是其它问题？
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
8楼2012-12-26 15:10:23
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lidanye

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bradyluo at 2012-12-26 14:24:39
不清晰可能是照胶的时候被污染了啊，我用DNA试剂盒怎么会有RNA呢？...

提的DNA里有RNA污染是蛮经常发生的事情，如果没有加RNAase处理或者处理效果不够的话，不管是用试剂盒还是别的方法
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9楼2012-12-26 22:31:55
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55晴朗天天

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by bradyluo at 2012-12-26 14:23:30
有这么大的marker啊？什么marker啊？...

我一般跑DNA用15000 的maker  跑PCR产物用 2000的maker
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有梦就有希望！想就有可能！
10楼2012-12-27 10:31:57
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