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chuxuan

铜虫 (正式写手)

[求助] 求大神进来帮忙分析下

我做的是个同源重组。(用其它基因替代了原始菌株上的基因。并加了个抗性SPC用来做筛选)
做完之后,在抗性平板上筛选跟预期的完全一样。
然后我通过PCR验证。(替换的基因片段比较大)
验证出来,有点问题。
筛到的突变株,我加的那目的片段大小P出来了。但原始菌株那片段本应该被替换掉了,但还是也给P出来了。而且还比预期加进去的目的片段P出来的还亮。搞不懂是怎么回事。
我做同源重组的时候,载体是个自杀性载体。。没有整合到染色体上去就会死掉。。不至于目的片段是从载体上面P下来的?
很是困惑。。请大神给予分析下。
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chuxuan

铜虫 (正式写手)

自己顶一个。
2楼2013-06-09 11:04:34
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

帮顶一次啊
海纳百川止于至善
3楼2013-06-09 14:18:14
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ankey呦

新虫 (初入文坛)

前辈你好,我也遇到了和您一样的问题,想问下您后来是如何解决此问题的呢?期待您的回复谢谢!
4楼2015-07-19 17:01:22
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LIN琳LIN

新虫 (初入文坛)

我也是做这个的,初学,请问有具体的相关文献么?
5楼2017-02-22 11:26:05
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