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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 求大神进来帮忙分析下
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chuxuan

铜虫 (正式写手)

[求助] 求大神进来帮忙分析下

我做的是个同源重组。（用其它基因替代了原始菌株上的基因。并加了个抗性SPC用来做筛选）
做完之后，在抗性平板上筛选跟预期的完全一样。
然后我通过PCR验证。（替换的基因片段比较大）
验证出来，有点问题。
筛到的突变株，我加的那目的片段大小P出来了。但原始菌株那片段本应该被替换掉了，但还是也给P出来了。而且还比预期加进去的目的片段P出来的还亮。搞不懂是怎么回事。
我做同源重组的时候，载体是个自杀性载体。。没有整合到染色体上去就会死掉。。不至于目的片段是从载体上面P下来的？
很是困惑。。请大神给予分析下。
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1楼 2013-06-08 11:15:43
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ankey呦

新虫 (初入文坛)
前辈你好，我也遇到了和您一样的问题，想问下您后来是如何解决此问题的呢？期待您的回复谢谢！
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4楼2015-07-19 17:01:22
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LIN琳LIN

新虫 (初入文坛)
我也是做这个的，初学，请问有具体的相关文献么？
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5楼2017-02-22 11:26:05
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