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[求助]
求大神进来帮忙分析下
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我做的是个同源重组。（用其它基因替代了原始菌株上的基因。并加了个抗性SPC用来做筛选） 做完之后，在抗性平板上筛选跟预期的完全一样。 然后我通过PCR验证。（替换的基因片段比较大） 验证出来，有点问题。 筛到的突变株，我加的那目的片段大小P出来了。但原始菌株那片段本应该被替换掉了，但还是也给P出来了。而且还比预期加进去的目的片段P出来的还亮。搞不懂是怎么回事。 我做同源重组的时候，载体是个自杀性载体。。没有整合到染色体上去就会死掉。。不至于目的片段是从载体上面P下来的？ 很是困惑。。请大神给予分析下。 |
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