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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相条件摸索
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hongying1990

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相条件摸索

想请教一下懂液相的高手，如果要摸索液相条件，我该从哪些方面入手呢？不甚感激
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1楼 2013-06-05 16:54:28
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hongying1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2013-06-06 09:12:54
先看下分子结构 如果有羧基等极性基团的话 一般需要用缓冲盐 此外 如果用的是反相柱的话 两个峰分不开 在梯度中适当增加水相的比例

我是测植物油中的甘油三酯，成分比较复杂，流动相用的是乙腈和异丙醇，峰是分为几簇的，不知道怎么更好的把那几簇峰分开
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7楼2013-06-12 14:57:35
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来~ 2013-06-06 09:34:29
首先搞清楚待测组分的物化性质(极性、溶解度、pH值、官能团分布），再选择合适的色谱柱和流动相在合适的检测波长（选择响应较高且吸收光谱曲线平缓区）下进行，先可以进行梯度洗脱找一个合适的配比。
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2楼2013-06-05 17:01:10
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hongying1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yugijiang at 2013-06-05 17:01:10
首先搞清楚待测组分的物化性质(极性、溶解度、pH值、官能团分布），再选择合适的色谱柱和流动相在合适的检测波长（选择响应较高且吸收光谱曲线平缓区）下进行，先可以进行梯度洗脱找一个合适的配比。

看了一些文献，色谱柱、流动相、检测器也差不多确定了，只是梯度不会调整，就是自己在瞎捉摸，有的时候把时间增加反而没有峰了
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3楼2013-06-05 18:50:17
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孤单过客

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hongying1990: 金币+1, ★有帮助 2013-06-12 15:04:32
你的HPLC有用loading column 和analytical column吗？一般的文献都不讨论loading column，只讨论analytical column的条件，峰没有了，可以检查一下你的switching time是否合适。梯度一般从低浓度的有机溶剂开始试，逐渐增加，尤其要注意柱子的平衡，一定耐心一点。Good luck！
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4楼2013-06-06 01:15:17
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