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hongying1990

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相条件摸索

想请教一下懂液相的高手,如果要摸索液相条件,我该从哪些方面入手呢?不甚感激
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来~ 2013-06-06 09:34:56
hongying1990: 金币+2, 有帮助 2013-06-12 14:58:39
先别着急进行实验,把待测物质的理化性质都弄清楚了,然后再选择合适的色谱柱和流动相,如果能再参考些文献就更好了,最后适当调整流动相比例,色谱柱类型,柱温等等。走梯度特别适合多种物质分离,二元不够可以三元,三元不够可以四元,梯度根据实际分离效果调整吧
5楼2013-06-06 07:27:30
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来~ 2013-06-06 09:34:29
首先搞清楚待测组分的物化性质(极性、溶解度、pH值、官能团分布),再选择合适的色谱柱和流动相在合适的检测波长(选择响应较高且吸收光谱曲线平缓区)下进行,先可以进行梯度洗脱找一个合适的配比。
2楼2013-06-05 17:01:10
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hongying1990

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yugijiang at 2013-06-05 17:01:10
首先搞清楚待测组分的物化性质(极性、溶解度、pH值、官能团分布),再选择合适的色谱柱和流动相在合适的检测波长(选择响应较高且吸收光谱曲线平缓区)下进行,先可以进行梯度洗脱找一个合适的配比。

看了一些文献,色谱柱、流动相、检测器也差不多确定了,只是梯度不会调整,就是自己在瞎捉摸,有的时候把时间增加反而没有峰了
3楼2013-06-05 18:50:17
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孤单过客

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


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hongying1990: 金币+1, 有帮助 2013-06-12 15:04:32
你的HPLC有用loading column 和analytical column吗?一般的文献都不讨论loading column,只讨论analytical column的条件,峰没有了,可以检查一下你的switching time是否合适。梯度一般从低浓度的有机溶剂开始试,逐渐增加,尤其要注意柱子的平衡,一定耐心一点。Good luck!
4楼2013-06-06 01:15:17
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