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Ljiancai

金虫 (小有名气)

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虫号: 1218099
注册: 2011-03-02
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专业: 系统生物学

[求助] 帮忙分析一下HPLC色谱图

各位大侠，最近导师让做一个类似代谢组的实验，用纯甲醇提取了水稻的粗提物，用HPLC分析，怎么跑都是只有几个峰（见附图），C8 和C18柱都用过，结果都差不多。进样程序为：用水和乙腈做为流动相，0-6min，乙腈达到流动相混合液的18％，6-15min，乙腈达到22％，15-30min，乙腈达到58％。设定254m、320nm、210nm、360hm为观测波长。实验室很久以前有师姐做过，跑出来峰还不错（见附图），苦于一直联系不上，没法交流，有哪位大侠可以指点迷津？悬赏额的所有积分啦（小虫只有金币十几枚）.

前人做的.jpg

自己做的.jpg

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1楼 2013-06-02 13:22:40

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Ljiancai

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by qimingfu at 2013-06-08 18:15:14
我有种感觉，像是你的东西没有提取出来一样。你是用甲醇去提取水稻上的目标物吗？后面有净化过程不？我们这里经常用甲醇或乙腈去提取水稻的植株，液相色谱图应该比你的图乱的多，更像你师姐的图，会有很多杂质峰。但 ...

是用甲醇提水稻的代谢物,没有做过净化,如果说有净化的话那就是14000rpm离心10分钟,我觉得提取的过程应该不会有问题,因为很简单,就是用甲醇震荡离心,我也感觉机器有问题就是不知道问题在哪,依你的经验应该是哪里出了问题?

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