应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T载体自连
51/1返回列表
查看: 4854  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] T载体自连

做蓝白斑筛选的时候，空白使用不含目的片段的T载体+感受态+SOC培养基做的，但是每次平板里面长出来的白斑和蓝斑都不少，绝大部分是蓝斑。抗生素、X-GAL、IPTG都没有问题，这是载体自连吗？有什么方法减少载体自连的？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-05-27 21:25:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 实心小白菜 at 2013-05-28 08:49:05
蓝白斑的颜色变化比菌落长得慢，你可以在转化完了，菌长好了之后，放在四度1到2天，这样没来得及变成蓝色的假阳性就都变成蓝色了，然后你再看看效率。只要泛蓝，就是蓝斑，再挑白斑，成功率高点，如果都是蓝的，那就 ...

谢谢，我一般都是4度放半天的，1-2天会不会太久了，X-gal都降解了
赞一下 回复此楼
10楼2013-05-28 17:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

protura

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-05-28 19:47:55
个人经验，空白对照中的载体自连是难以避免的，蓝白斑筛选并不绝对，有时做克隆时挑取的白斑也是阴性。只好每次加大挑取菌落的数量，比如3-5个，确保能挑到阳性克隆。
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-28 08:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
说明T载体质量不行了。是不是放时间久了？
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-28 08:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by protura at 2013-05-28 08:23:03
个人经验，空白对照中的载体自连是难以避免的，蓝白斑筛选并不绝对，有时做克隆时挑取的白斑也是阴性。只好每次加大挑取菌落的数量，比如3-5个，确保能挑到阳性克隆。

我上次一次性挑了20个，结果全是假阳性
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-28 08:29:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭