24小时热门版块排行榜    

查看: 5235  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] T载体自连

做蓝白斑筛选的时候,空白使用不含目的片段的T载体+感受态+SOC培养基做的,但是每次平板里面长出来的白斑和蓝斑都不少,绝大部分是蓝斑。抗生素、X-GAL、IPTG都没有问题,这是载体自连吗?有什么方法减少载体自连的?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 实心小白菜 at 2013-05-28 08:49:05
蓝白斑的颜色变化比菌落长得慢,你可以在转化完了,菌长好了之后,放在四度1到2天,这样没来得及变成蓝色的假阳性就都变成蓝色了,然后你再看看效率。只要泛蓝,就是蓝斑,再挑白斑,成功率高点,如果都是蓝的,那就 ...

谢谢,我一般都是4度放半天的,1-2天会不会太久了,X-gal都降解了
10楼2013-05-28 17:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

protura

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-05-28 19:47:55
个人经验,空白对照中的载体自连是难以避免的,蓝白斑筛选并不绝对,有时做克隆时挑取的白斑也是阴性。只好每次加大挑取菌落的数量,比如3-5个,确保能挑到阳性克隆。
2楼2013-05-28 08:23:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
说明T载体质量不行了。是不是放时间久了?
3楼2013-05-28 08:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by protura at 2013-05-28 08:23:03
个人经验,空白对照中的载体自连是难以避免的,蓝白斑筛选并不绝对,有时做克隆时挑取的白斑也是阴性。只好每次加大挑取菌落的数量,比如3-5个,确保能挑到阳性克隆。

我上次一次性挑了20个,结果全是假阳性
4楼2013-05-28 08:29:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +9 majunge000 2026-08-11 11/550 2026-08-15 23:20 by botar
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见