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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫荧光一抗可以与目的蛋白是相同种属吗
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timmychina

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 免疫荧光一抗可以与目的蛋白是相同种属吗

免疫荧光一抗可以与目的蛋白是相同种属吗
印象中是不可以的，但是有些抗体信息中确可以。比如abcam的某个mouse monoclonal antibody，在reactivity里表明有mouse，human等。
谁帮我解答下，感谢
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彩云之南的愿望还能实现吗
1楼2013-05-26 13:24:51
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生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-05-27 08:37:34
timmychina: 金币+10 2013-05-27 10:07:04
他那个信息应该指的是识别的蛋白可以是鼠源的，也可以是人源。这个表明你的目的蛋白比较保守。你的问题应该是二抗识别的种属问题吧，是不是不确定二抗能够瞒过一抗直接识别你的目的蛋白？！如果是这个问题的话，应该看你的目的蛋白是不是免疫球蛋白类的，不是的话一般没有问题。
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学习，进步
3楼2013-05-26 15:58:37
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)
这个要看蛋白的结合位点
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2楼2013-05-26 15:12:28
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timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-05-26 15:58:37
他那个信息应该指的是识别的蛋白可以是鼠源的，也可以是人源。这个表明你的目的蛋白比较保守。你的问题应该是二抗识别的种属问题吧，是不是不确定二抗能够瞒过一抗直接识别你的目的蛋白？！如果是这个问题的话，应该 ...

十分感谢这么专业的回复。具体信息是这样的：
我想做小鼠某肿瘤细胞的双标免疫荧光，其中一个抗体是自己实验室制备的免疫兔的多克隆，另外一个抗体打算买商品化的。此商品化抗体有三个来源分别是：兔多克隆、小鼠单克隆和山羊多克隆。第一个兔多克隆肯定是不能买了，山羊多克隆在应用信息里不能做免疫荧光，因此只能选择小鼠单克隆了。
小鼠单克隆这支抗体的reactivity：Mouse, Chicken, Human, Pig, Xenopus laevis, Chinese Hamster
Application:Flow Cyt, ICC, ICC/IF, IHC-P, WB。
至于你说的目的蛋白是不是免疫球蛋白，我不是很了解这方面的知识。我的目的蛋白是肿瘤细胞内源性的蛋白，是一种tubulin。
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彩云之南的愿望还能实现吗
4楼2013-05-27 10:06:56
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timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 生物小通 at 2013-05-26 15:58:37
他那个信息应该指的是识别的蛋白可以是鼠源的，也可以是人源。这个表明你的目的蛋白比较保守。你的问题应该是二抗识别的种属问题吧，是不是不确定二抗能够瞒过一抗直接识别你的目的蛋白？！如果是这个问题的话，应该 ...

补充一下：我的问题就是如果买了这个mouse monoclonal的抗体，二抗选择山羊抗鼠的话，担心二抗除了与一抗结合目的蛋白还会与小鼠肿瘤细胞内的其他内源性蛋白出现比较多的非特异性结合，如果有这种可能性的话，这支抗体就不能选择了。
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彩云之南的愿望还能实现吗
5楼2013-05-27 10:11:04
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