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wpy890718

铁虫 (小有名气)

[交流] 材料做SEM,找不到细胞 已有9人参与

做细胞活性检测时证明材料上有细胞,但是2.5%的戊二醛固定后梯度脱水,喷金照SEM却找不到细胞,是哪里出了问题
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hnulys at 2013-05-24 16:10:35
培养多长时间?有可能细胞量太少,找的地方不对

1,3,7天分别取出,用的24孔板,每孔30,000个细胞
5楼2013-05-24 21:40:45
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wpy890718

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Aniabia at 2013-05-24 17:29:47
先染色,荧光观测看是否有细胞。确定有了过后,再做SEM。

那用荧光染色前用4%的多聚甲醛固定,做扫描电镜前用戊二醛固定,如果用多聚甲醛固定之后,染色,荧光观察之后,还用戊二醛再次固定吗?还是直接干燥喷金
6楼2013-05-24 21:43:57
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wpy890718

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bluern at 2013-05-24 18:14:57

和干燥有关。乙醇直接挥发的话,细胞都是一坨坨的。没有啥形貌。不立体~~

那如果没有二氧化碳超临界干燥设备,冻干可以吗,会影响形貌吗?
7楼2013-05-24 21:45:57
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