| 查看: 1928 | 回复: 23 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
包涵体复性
|
||
|
最近做两个蛋白，复性的时候遇到问题，换了好几个复性条件，结果总是在2MU的时候完全沉淀。上次做出来了用的复性Buffer为20mMTris，0.015%SDS，1mMEDTA和分别的2MU、1MU、0MU 首先是进行稀释1倍（用枪逐滴加入），然后分别依次透析 今天重复做，不知道为什么总是在稀释复性的时候就沉淀了，为什么 请大家指教 |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有82人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
9楼2013-05-24 14:34:38
2楼2013-05-23 14:32:12
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
475502411: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-24 09:19:52
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-03 13:45:59
感谢参与，应助指数 +1
475502411: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-24 09:19:52
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-03 13:45:59
|
并不是所有的蛋白都可以稀释复性。 有一些蛋白分子无法越过中间态而转向于聚集沉淀，这是正常的。通常透析时浓度在0.1一下，可以加入0.5M arg抑制分子聚集，进而使复性向正确折叠的方向移动。 你的蛋白天然状态有没有二硫键呢？这个你要确定，因为有二硫键的话你要用氧化还原体系来形成正确的链内二硫键。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4755024113楼2013-05-24 08:21:00
4楼2013-05-24 09:19:33
