应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 包涵体复性
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1552  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

[求助] 包涵体复性

最近做两个蛋白，复性的时候遇到问题，换了好几个复性条件，结果总是在2MU的时候完全沉淀。上次做出来了用的复性Buffer为20mMTris，0.015%SDS，1mMEDTA和分别的2MU、1MU、0MU
首先是进行稀释1倍（用枪逐滴加入），然后分别依次透析
今天重复做，不知道为什么总是在稀释复性的时候就沉淀了，为什么
请大家指教
回复此楼

» 猜你喜欢
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
1楼 2013-05-22 16:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-24 07:21:00
并不是所有的蛋白都可以稀释复性。
有一些蛋白分子无法越过中间态而转向于聚集沉淀，这是正常的。通常透析时浓度在0.1一下，可以加入0.5M arg抑制分子聚集，进而使复性向正确折叠的方向移动。
你的蛋白天然状态有 ...

终于有人回复我了，谢谢了
我之前按照个体系成功复性过一次，活性也很高，但是就仅仅一次，现在做了三次都重复不出来，都是1倍稀释复性的时候就沉淀了，也不知道为什么？
这个蛋白本身有7个二硫键
但是37度培养一般是包涵体一般是上清表达，30度差不多都是上清表达了，但是挂不上Ni柱，我就把他表达成沉淀复性了，因为我刚开始想本身是上清表达复性应该比较容易的
请指教
谢谢
赞一下 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
4楼2013-05-24 09:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

475502411

铜虫 (著名写手)
怎么没人回答呢？自己顶一下
赞一下 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
2楼2013-05-23 14:32:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

edoz1986

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
475502411: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-24 09:19:52
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-03 13:45:59
并不是所有的蛋白都可以稀释复性。
有一些蛋白分子无法越过中间态而转向于聚集沉淀，这是正常的。通常透析时浓度在0.1一下，可以加入0.5M arg抑制分子聚集，进而使复性向正确折叠的方向移动。
你的蛋白天然状态有没有二硫键呢？这个你要确定，因为有二硫键的话你要用氧化还原体系来形成正确的链内二硫键。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

475502411
3楼2013-05-24 08:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物小通

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
475502411: 金币+2 2013-05-30 11:51:14
复性成功是怎么确定的？我来学习一下，你的蛋白可溶性表达这么多，真心幸福啊。我的蛋白也是挂不到Ni柱上，后来换用了磁珠纯化，虽然效率有点低，但是纯化出来了，纯度也可以，建议尝试。
赞一下 回复此楼
学习，进步
5楼2013-05-24 09:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:40 by 1018329917
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +5 李李不服输 2026-03-26 5/250 2026-03-29 13:40 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 南京大学化学调剂 +5 景随风 2026-03-29 8/400 2026-03-29 13:00 by 无际的草原
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-24 5/250 2026-03-29 08:55 by qingfeng258
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 332求调剂 +4 @MZB382400 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:02 by 唐沐儿
[考研] 286求调剂 +4 丢掉懒惰 2026-03-27 7/350 2026-03-28 08:07 by baoball
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 283求调剂（080500） +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭