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wangaiqin924

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取的电泳结果分析

脉翅目蚁蛉科，进行DNA提取，PCR扩增，电泳。
干标本，一开始采用的是天根的试剂盒，进行提取，采用脉翅总目的通用引物，结果不理想。后来用CTAB法进行了一次提取，结果电泳也是没有条带。测了一下DNA的浓度和OD值如下：
所测DNA浓度和OD值
标本编号        浓度（ng/ul）        OD(260/280)        电泳结果       
1        20.8        6.69        无条带       
2        2.6        85.63        无条带       
3        4.9        -41.67        无条带       
4        6.2        3.50        无条带       
5        10.7        2.31        无条带       
6        -2.5        -47.35        无条带       
9        44.3        2.17        条带清晰       
11        122.0        1.68        无条带       
12        36.9        2.38        条带清晰       
13        41.9        2.05        无条带       
18        98.9        2.0        无条带       
请各位大师帮忙分析一下。为什么会这样，是所要的片段浓度低，还是引物不合适啊。
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1楼 2013-05-13 15:53:26
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wangaiqin924

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jkamm at 2013-05-16 15:38:31
个人觉得，DNA浓度貌似浓度不低，同样体系，同批试验吗？OD260/280咋会那样复杂数据？建议你找下DNA浓度、纯度、取样误差大三因素。

多谢，已经找到原因了，应该是抑制物浓度高的问题，在将DNA稀释之后，再检测，结果就好多了。还是很感谢。
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3楼2013-05-17 10:41:33
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jkamm

金虫 (正式写手)
个人觉得，DNA浓度貌似浓度不低，同样体系，同批试验吗？OD260/280咋会那样复杂数据？建议你找下DNA浓度、纯度、取样误差大三因素。
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-16 15:38:31
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