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wangaiqin924

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取的电泳结果分析

脉翅目蚁蛉科,进行DNA提取,PCR扩增,电泳。
干标本,一开始采用的是天根的试剂盒,进行提取,采用脉翅总目的通用引物,结果不理想。后来用CTAB法进行了一次提取,结果电泳也是没有条带。测了一下DNA的浓度和OD值如下:
所测DNA浓度和OD值
标本编号        浓度(ng/ul)        OD(260/280)        电泳结果       
1        20.8        6.69        无条带       
2        2.6        85.63        无条带       
3        4.9        -41.67        无条带       
4        6.2        3.50        无条带       
5        10.7        2.31        无条带       
6        -2.5        -47.35        无条带       
9        44.3        2.17        条带清晰       
11        122.0        1.68        无条带       
12        36.9        2.38        条带清晰       
13        41.9        2.05        无条带       
18        98.9        2.0        无条带       
请各位大师帮忙分析一下。为什么会这样,是所要的片段浓度低,还是引物不合适啊。
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wangaiqin924

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jkamm at 2013-05-16 15:38:31
个人觉得,DNA浓度貌似浓度不低,同样体系,同批试验吗?OD260/280咋会那样复杂数据?建议你找下DNA浓度、纯度、取样误差大三因素。

多谢,已经找到原因了,应该是抑制物浓度高的问题,在将DNA稀释之后,再检测,结果就好多了。还是很感谢。
3楼2013-05-17 10:41:33
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jkamm

金虫 (正式写手)

个人觉得,DNA浓度貌似浓度不低,同样体系,同批试验吗?OD260/280咋会那样复杂数据?建议你找下DNA浓度、纯度、取样误差大三因素。
2楼2013-05-16 15:38:31
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