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child2012

新虫 (小有名气)

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[求助] 乙酰胆碱酯酶活力测定中的问题

关于乙酰胆碱酯酶活力的测定，都是采用Ellman（1961）法，有3个不明白的地方请教：1可是有的人做时用谷胱甘肽，有的人做却没有用，据原理来看，谷胱甘肽根本没有起作用，那么到底需要还是不需要呢？
2 在测定步骤的表格中，需加入 Asch-DTNB(1:2) 这个是自己配制的混合溶液吗？
3 从哪里能买到毒扁碱？

请懂得一定回答，我着急的心情，你懂得。

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changemyself,changelife.

1楼2013-05-10 11:38:29

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satear

新虫 (初入文坛)

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我想问一下怎么测定游离乙酰胆碱酯酶的活性，具体方案是怎样的？谢谢

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5楼2015-03-18 12:14:03

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ckgzp

金虫 (初入文坛)

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1、2两个问题我不清楚，因为没做过这个实验，但是毒扁豆碱我以前用过知道哪里有卖。广州科因生物公司可以卖，20mg要 398元，电话15817051471

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开心每一天，奋斗每一天！

2楼2013-05-10 16:56:02

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panyiou88

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
child2012: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-14 17:34:05

1.做乙酰胆碱酯酶不需要谷胱甘肽。谷胱甘肽是测谷胱甘肽-S-转移酶的；
2.测乙酰胆碱酯酶活性，要先加入底物，即硫代乙酰胆碱（ASch），反应完后加入染色剂DTNB，会生成蓝色的沉淀，在412nm处测OD值。
3.毒扁豆碱（eserine）在sigma公司就有卖的。
你应该了解下乙酰胆碱酯酶的基本知识，和测定的反应原理就知道了。

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3楼2013-05-13 21:25:06

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