24小时热门版块排行榜    

查看: 1925  |  回复: 5

child2012

新虫 (小有名气)

[求助] 乙酰胆碱酯酶活力测定中的问题

关于乙酰胆碱酯酶活力的测定,都是采用Ellman(1961)法,有3个不明白的地方请教:1可是有的人做时 用谷胱甘肽,有的人做却没有用,据原理来看,谷胱甘肽根本没有起作用,那么到底需要还是不需要呢?
2 在测定步骤的表格中,需加入 Asch-DTNB(1:2)  这个是自己配制的混合溶液吗?
3 从哪里能买到 毒扁碱?

请懂得一定回答,我着急的心情,你懂得。
回复此楼
changemyself,changelife.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ckgzp

金虫 (初入文坛)

1、2两个问题我不清楚,因为没做过这个实验,但是毒扁豆碱我以前用过知道哪里有卖。广州科因生物公司可以卖,20mg要 398元,电话15817051471
开心每一天,奋斗每一天!
2楼2013-05-10 16:56:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panyiou88

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
child2012: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-14 17:34:05
1.做乙酰胆碱酯酶不需要谷胱甘肽。谷胱甘肽是测谷胱甘肽-S-转移酶的;
2.测乙酰胆碱酯酶活性,要先加入底物,即硫代乙酰胆碱(ASch),反应完后加入染色剂DTNB,会生成蓝色的沉淀,在412nm处测OD值。
3.毒扁豆碱(eserine)在sigma公司就有卖的。
你应该了解下乙酰胆碱酯酶的基本知识,和测定的反应原理就知道了。
3楼2013-05-13 21:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scro

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
child2012: 金币+5, ★★★很有帮助, xiexie 2013-05-14 17:33:54
1.还原型谷胱甘肽是用来作AchE酶比活力的标准曲线。在测定体系中,是用不到的。
以下是测定体系中用的药剂。
2.Asch-DTNB,是作为底物与显示剂。
3.毒扁碱是用来终止反应的。

用分光光度计的方法,以上是。非常麻烦
得出的是OD值,用OD值再用标准曲线转换,才能得到酶活。
解惑
4楼2013-05-14 12:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

satear

新虫 (初入文坛)

我想问一下怎么测定游离乙酰胆碱酯酶的活性,具体方案是怎样的?谢谢
5楼2015-03-18 12:14:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谷云飞

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by panyiou88 at 2013-05-13 23:25:06
1.做乙酰胆碱酯酶不需要谷胱甘肽。谷胱甘肽是测谷胱甘肽-S-转移酶的;
2.测乙酰胆碱酯酶活性,要先加入底物,即硫代乙酰胆碱(ASch),反应完后加入染色剂DTNB,会生成蓝色的沉淀,在412nm处测OD值。
3.毒扁豆碱( ...

楼主确定是蓝色沉淀吗? 为什么我们做的都是淡黄色呢?显色剂就是淡黄色的呀
Stay hungry,Stay foolish
6楼2021-07-25 09:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 child2012 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸! 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 0703化学调剂 +10 妮妮ninicgb 2026-03-15 14/700 2026-03-19 22:59 by 学员8dgXkO
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 6/300 2026-03-19 17:18 by fei626-918
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
信息提示
请填处理意见