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实验小奴才

新虫 (初入文坛)

[求助] 土壤中菌根真菌孢子的筛选

我运用湿筛法从土壤中筛选菌根真菌的孢子,一直筛不出来,但是对寄主植物根染色能看到菌丝,请问有没有前辈可以指导一下筛选方法啊?
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yyr720

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2013-05-10 16:31:14
你用的最下层筛子的孔径有多大?是不是漏下去了?
时间,只要你充分利用,它便是长久的
2楼2013-05-10 00:24:40
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实验小奴才

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyr720 at 2013-05-10 00:24:40
你用的最下层筛子的孔径有多大?是不是漏下去了?

是400目的,这个应该不会漏吧!我看文献上一般都是200目啊!筛选出来怎么鉴别是不是孢子啊?要通过染色吗?还有就是怎么把孢子分离出来呢?谢谢!!!
3楼2013-05-10 18:25:23
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
实验小奴才: 金币+5, 有帮助 2013-05-16 22:09:27
在解剖镜下,菌根真菌的孢子无须染色就可见,由于孢子大小形态规则,易于和土壤中杂质分别开,一般可用移液枪移取
4楼2013-05-16 16:46:37
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实验小奴才

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liygmail at 2013-05-16 16:46:37
在解剖镜下,菌根真菌的孢子无须染色就可见,由于孢子大小形态规则,易于和土壤中杂质分别开,一般可用移液枪移取

谢谢!孢子是几近半透明的吗?浅棕色吗?
5楼2013-05-16 21:48:54
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

6楼2013-05-17 22:19:43
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实验小奴才

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by liygmail at 2013-05-17 22:19:43
是的

枪头要吸一些水吗?
7楼2013-05-17 22:43:15
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

将湿筛后土样和一些残留的水混合倒在几个培养皿里,用带枪头的移液枪吸取含有孢子的水移至装有干净水的培养皿,如果还有杂质,可连续多转移几个培养皿,
8楼2013-05-18 21:08:23
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实验小奴才

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by liygmail at 2013-05-18 21:08:23
将湿筛后土样和一些残留的水混合倒在几个培养皿里,用带枪头的移液枪吸取含有孢子的水移至装有干净水的培养皿,如果还有杂质,可连续多转移几个培养皿,

不需要蔗糖浓度梯度离心吗?
9楼2013-05-19 09:58:42
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

如果少量提取孢子,可在解剖镜下用移液枪吸取,依次几个盛放干净水的培养皿中漂洗,一般就可以去除大多杂质。
如果大量提取孢子,可将样品用流水冲洗,过筛,再将筛倒置,用流水将筛面截留的孢子洗入小烧杯中,摇动混匀,转移至50ml离心管,再轻缓加入等量60% (w/v) 蔗糖溶液,3000 rpm 离心 2 min,大部分孢子集中分布于上层水相和下层蔗糖之间,移取即可,(某些种的孢子可能在糖溶液里,过筛,可回收)
10楼2013-05-19 13:02:36
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