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porphybaby

金虫 (正式写手)

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[求助] 冰上操作~还有关于PCR小管子的拿法

我觉得冰上操作真是个很讨厌的东西
特别是做RNA相关的那些冰都会逐渐融掉的
而一开始的话那些冰块之间又好像好多空隙放PCR的管子插在上面
觉得根本就有些是没接触到的。。。

还有就是那些PCR小管啊我想问怎么拿啊

比如你要加1 uL 或者 0.5 uL 那你肯定会从孔板上拿出来啊
应该怎么拿才对呢

我已经反复喷那些除RNAase的东西还有都注意了冰上操作

但还是P不出条带啊。。。这是怎么回事。。。

其实是有的能出来有的就出不来。。

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1楼 2013-05-04 00:08:40

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竹子小小

木虫 (小有名气)

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我用DNAPCR都不用冰啊，经常丢外面也没有事，RNA合成第一链了也就不用小心了。想用冰的话有种东西叫冰盒。

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9楼2013-05-06 18:52:10

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

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porphybaby(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-04 01:30:37
porphybaby: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-05-06 00:37:26

你用的冰是用碎冰机做出来的吗？如果是的话，应该不会有很大空隙。如果冰块比较大，可以加一些水做冰水浴，接触效果比只用冰更好。
0.2ml的PCR管有专门的holder。没有的话，可以用200μl的枪头盒作为支架。加小量体积的液体不需要从冰上拿出来，做多了就习惯了。
很多样品都是要冰上操作的，但如果你用的是hotstart的DNA聚合酶，混合时可以在室温下。PCR做不出的原因很多，每一步做好对照，应该可以确定问题在哪里。

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2楼2013-05-04 00:36:45

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