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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 冰上操作~~~还有关于PCR小管子的拿法~~
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porphybaby

金虫 (正式写手)

[求助] 冰上操作~~~还有关于PCR小管子的拿法~~

我觉得冰上操作真是个很讨厌的东西
特别是做RNA相关的 那些冰都会逐渐融掉的
而一开始的话 那些冰块之间又好像好多空隙 放PCR的管子插在上面
觉得根本就有些是没接触到的。。。

还有就是那些PCR小管啊 我想问 怎么拿啊

比如你要加1 uL 或者 0.5 uL 那 你肯定会 从孔板上拿出来啊
应该怎么拿才对呢

我已经 反复喷那些 除RNAase的东西 还有 都注意了冰上操作

但还是P不出条带啊。。。这是怎么回事。。。

其实是有的能出来 有的就出不来。。
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1楼 2013-05-04 00:08:40
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
porphybaby(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-04 01:30:37
porphybaby: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-05-06 00:37:26
你用的冰是用碎冰机做出来的吗？如果是的话，应该不会有很大空隙。如果冰块比较大，可以加一些水做冰水浴，接触效果比只用冰更好。
0.2ml的PCR管有专门的holder。没有的话，可以用200μl的枪头盒作为支架。加小量体积的液体不需要从冰上拿出来，做多了就习惯了。
很多样品都是要冰上操作的，但如果你用的是hotstart的DNA聚合酶，混合时可以在室温下。PCR做不出的原因很多，每一步做好对照，应该可以确定问题在哪里。
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2楼2013-05-04 00:36:45
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你也太小心了吧！是个女同学吧？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-05-04 00:37:23
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诸葛小汐

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
porphybaby(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-04 01:31:05
我觉得冰只是提供了一个比较冷的环境，所以并不是需要一定接触冰，只要在冰维持的较低温的环境里面即可。关于PCR的小管子，应该有专门的板子……2楼正解

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-05-04 01:15:32
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panyuzhu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-05-04 12:22:36
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-06 02:06:28
接触不接触不是大问题，主要是使得温度尽可能低一些。PCR管子放在那种专门的PCR板子上就可以了。
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总有一天我要修改用户名。
6楼2013-05-04 13:38:15
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porphybaby

金虫 (正式写手)
我已经解决问题了。其实我发现真的不用拿出来的，但是 就 加样的时候 小心一点咯

就 不需要说看着枪头伸到液面下 再加

我这几天后来做出来了~~~~
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7楼2013-05-06 00:39:00
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原野漫漫

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2013-05-06 18:04:50
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竹子小小

木虫 (小有名气)
我用DNAPCR都不用冰啊，经常丢外面也没有事，RNA合成第一链了也就不用小心了。想用冰的话 有种东西叫冰盒。
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9楼2013-05-06 18:52:10
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