应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR扩增结果不好
132/2返回列表上一页12
查看: 1707  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小绘64

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by mruber at 2013-05-03 21:31:24
我也觉得扩增时对酶的选择很重要。不同品牌的差别还是比较大。另外就是要选择适宜的扩增温度和条件，同时仔细阅读厂商推荐的说明书。
推荐你使用KOD系列(TOYOBO),我一直都用，扩增效率杠杠的。

谢谢你，，，前三个泳道我就用的普通的Taq酶，扩增效率也很好的。后两组因为课题需要，需要用无3‘到5’外切酶活性的聚合酶，所以KOD系列的在这不合适，以后有需要会考虑用这个
赞一下 回复此楼
11楼2013-05-03 23:43:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小绘64

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by study韩 at 2013-05-02 22:04:28
第一，目的片段太小，退火温度设置的比较低，因此易出现引物条带！你可以做一个梯度吧，我觉得！第二，和酶肯定也有关系，不同的酶最适温度肯定不一样，所以酶也需要考虑下！第三，引物特异性应该仍需加强，毕竟片段 ...

这三组的模板用的是一样的，只是引物不一样，第一组用的正常DNA引物，效率还是可以的。后两组用的RNA引物，当然酶也不一样，同第一组该筛的条件都筛了，可是效率还是不高。。。
赞一下 回复此楼
12楼2013-05-03 23:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

study韩

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 小绘64 at 2013-05-03 23:45:43
这三组的模板用的是一样的，只是引物不一样，第一组用的正常DNA引物，效率还是可以的。后两组用的RNA引物，当然酶也不一样，同第一组该筛的条件都筛了，可是效率还是不高。。。...

额，那我就不知道了！不好意思！你再问问师兄师姐吧，祝你实验成功！
赞一下 回复此楼
13楼2013-05-04 08:55:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小绘64 的主题更新
132/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-31 01:27 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-31 00:56 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 12/600 2026-08-31 00:31 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:37 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:23 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 6/300 2026-08-30 19:02 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:51 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:40 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 17:36 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭