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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小绘64

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by mruber at 2013-05-03 21:31:24
我也觉得扩增时对酶的选择很重要。不同品牌的差别还是比较大。另外就是要选择适宜的扩增温度和条件,同时仔细阅读厂商推荐的说明书。
推荐你使用KOD系列(TOYOBO),我一直都用,扩增效率杠杠的。

谢谢你,,,前三个泳道我就用的普通的Taq酶,扩增效率也很好的。后两组因为课题需要,需要用无3‘到5’外切酶活性的聚合酶,所以KOD系列的在这不合适,以后有需要会考虑用这个
11楼2013-05-03 23:43:01
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小绘64

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by study韩 at 2013-05-02 22:04:28
第一,目的片段太小,退火温度设置的比较低,因此易出现引物条带!你可以做一个梯度吧,我觉得!第二,和酶肯定也有关系,不同的酶最适温度肯定不一样,所以酶也需要考虑下!第三,引物特异性应该仍需加强,毕竟片段 ...

这三组的模板用的是一样的,只是引物不一样,第一组用的正常DNA引物,效率还是可以的。后两组用的RNA引物,当然酶也不一样,同第一组该筛的条件都筛了,可是效率还是不高。。。
12楼2013-05-03 23:45:43
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study韩

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 小绘64 at 2013-05-03 23:45:43
这三组的模板用的是一样的,只是引物不一样,第一组用的正常DNA引物,效率还是可以的。后两组用的RNA引物,当然酶也不一样,同第一组该筛的条件都筛了,可是效率还是不高。。。...

额,那我就不知道了!不好意思!你再问问师兄师姐吧,祝你实验成功!
13楼2013-05-04 08:55:36
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