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小绘64

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增结果不好

前三个一组,中间三个一组,后三个一组。 每组的最后一个是空白对照。
每组用的模板都是一样的,引物不一样。
第一组扩增效果比较好,下面也没有引物条带,后两组扩增效率太低,有明显的引物条带。。。请问大家可以从哪些方面优化条件?

5.2-2.jpg
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mruber

金虫 (小有名气)

我也觉得扩增时对酶的选择很重要。不同品牌的差别还是比较大。另外就是要选择适宜的扩增温度和条件,同时仔细阅读厂商推荐的说明书。
推荐你使用KOD系列(TOYOBO),我一直都用,扩增效率杠杠的。
10楼2013-05-03 21:31:24
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guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个没有扩出来吧。。。多长的片段?
2楼2013-05-02 17:55:20
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小绘64(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-04 01:36:19
要是引物没问题的话,那就做个梯度PCR,改变退火温度试试,应该没有大问题
may
3楼2013-05-02 18:03:16
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baseball

禁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小绘64: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-05-02 21:01:22
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 22:08:13
本帖内容被屏蔽

4楼2013-05-02 20:06:01
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