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小绘64

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[求助] PCR扩增结果不好

前三个一组，中间三个一组，后三个一组。每组的最后一个是空白对照。
每组用的模板都是一样的，引物不一样。
第一组扩增效果比较好，下面也没有引物条带，后两组扩增效率太低，有明显的引物条带。。。请问大家可以从哪些方面优化条件？

5.2-2.jpg

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1楼 2013-05-02 17:14:22

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小绘64

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引用回帖:

10楼: Originally posted by mruber at 2013-05-03 21:31:24
我也觉得扩增时对酶的选择很重要。不同品牌的差别还是比较大。另外就是要选择适宜的扩增温度和条件，同时仔细阅读厂商推荐的说明书。
推荐你使用KOD系列(TOYOBO),我一直都用，扩增效率杠杠的。

谢谢你，，，前三个泳道我就用的普通的Taq酶，扩增效率也很好的。后两组因为课题需要，需要用无3‘到5’外切酶活性的聚合酶，所以KOD系列的在这不合适，以后有需要会考虑用这个