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襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

[求助] 关于稀释平板计数法的疑问

1.我用的浇注法,应该24h计数还是48h计数?
2.长了24h后培养基表面的菌落很明显,但是培养基内部的菌就是一个小点点,很难看到,稀释倍数低的平板像是10倍100倍1000倍几乎全部都是一个点一个点大片大片的挺均匀根本看不清。这时该怎么计数呢?稀释度高的培养基内部也有一些点点,是表面和内部的都记上去吗?
3.我一共做了7个梯度的十倍稀释。原菌液倒平板之前的OD是1.13了,稀释十倍之后变成0.13,稀释100倍是0.01,1000居然变成0了,后面的稀释度也是0左右。那这么看来菌液里的菌很少很少很少了,可是为什么平板计数后后面OD值是0的菌长出来的菌落还挺多啊,不数那些点点就差不多在30-300之间,数了差不多1000以上了。。。。
不懂怎么计数。我是想做一个CFU与OD之间关系的曲线来着。

是不是该等平板培养一段时间的同时要将相应稀释倍数的菌同等条件培养呢?是不是菌在平板里扩大培养了所以之前测的OD值是不对的?

[ Last edited by 襄阳蓉儿 on 2013-4-28 at 11:46 ]
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liuyi8203

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 襄阳蓉儿 at 2013-05-02 10:23:23
2.我稀释第7个10倍数出来的是100个菌落,每个平板接种的是0.2ml那计算公式应该是100*5*10(7次方)=5*10(9次方),那就是原菌液是这个浓度的是吧,那我需要1*10(6次方),这个是不是把我的原菌液稀释5000倍,是这 ...

有道理,不过个人认为用没用过的培养基做对照还是不够准确,要用培养过去除菌体的培养基就更好了。
12楼2013-05-02 11:08:54
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