24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

821078607

银虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 792.6
散金: 13
红花: 1
帖子: 256
在线: 59.9小时
虫号: 1261605
注册: 2011-04-11
专业: 光谱分析

[求助] 有关细胞总RNA提取

各位虫友：
大家好！
请教一个问题，我使用TRAZOl试剂提取细胞总RNA进行细胞因子测定,采用了多种不同的方式处理细胞，本来应该增加的细胞因子却呈现降低趋势，怀疑是RNA提取出现了问题，电泳进行了表征，很怪异。但是我将PCR之后的内标actin进行电泳，很正常，PCR是均在18左右出峰，不知道总RNA提取是否是失败，现附上电泳图请大家帮忙分析一下。

对细胞不同处理后12种样品的总RNA电泳图.jpg

12种样品actin的电泳图.png

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

提RNA和培养细胞的先后顺序已经有13人回复
植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么？已经有16人回复
【求助/交流】拟南芥保卫细胞原生质体RNA提取电泳图，出现反向弥散？已经有6人回复
trizol试剂提取细胞内总RNA时，加入试剂后一定要在4度下离心吗？已经有6人回复
新手用试剂盒提取植物RNA时的一些小问题已经有21人回复
Qiagen（MOBIO）土壤、血液、水样、植物、粪便、组织细胞DNA/RNA提取试剂盒已经有614人回复
24孔板细胞可以提RNA和蛋白吗已经有3人回复
如何提取单个细胞的RNA 已经有9人回复
Trizol 如何提起细胞培养液中的病毒RNA 已经有8人回复
【求助/交流】请教高手关于从细胞中提取总RNA 已经有8人回复
【求助/交流】从单个核细胞中提取RNA的问题？已经有3人回复
【求助/交流】Hela细胞中RNA的提取已经有6人回复
【求助/交流】寻能代做细胞中RNA提取的公司？？？已经有12人回复
有关RNA提取的问题已经有12人回复
谁能告诉我怎样在血液的淋巴细胞中提RNA 已经有8人回复

1楼 2013-04-23 20:49:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

raindick1231

铜虫 (小有名气)

应助: 9 (幼儿园)
金币: 93.3
帖子: 83
在线: 26.5小时
虫号: 649284
注册: 2008-11-08
性别: GG
专业: 植物学研究的新技术、新方

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
821078607(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励新虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-26 19:34:09
821078607: 金币+6, ★★★很有帮助, 非常感谢 2013-04-28 10:17:30

那个我做的植物用的也是TRIZOL，原理一样。我的经验是在取上清之前的一切步骤 “不需要” 注意RNase污染，但是样品不能过多（很重要！！！），而且要注意不要交叉污染。
取上清之后要小心，乙醇、异丙醇之类的不用多说降解了就换吧，配75乙醇的瓶子用锡箔纸封口多烘几个，枪头、EP管之类的耗材。。。我用的是包装上注明了RNase-free的，所以从来不用DEPC处理的，也不灭菌。。。成本也不高
唯一我认为比较麻烦的就是水了。。。。所以RNA很简单的我一般一口气提30个（离心机所限）希望对你有用，祝好运！