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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵罐污染，空白培养也染菌
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120300my

新虫 (初入文坛)

[求助] 发酵罐污染，空白培养也染菌

新买的500L发酵罐，前两次发酵无问题，第三次第四次开始染菌，于是做了空培，也还是会染菌，到16h后ph开始迅速下降
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1楼 2013-04-21 10:35:43
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李腾蛟

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, good！ 2013-04-21 15:25:29
amisking: 回帖置顶 2013-04-21 19:46:35
120300my: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-22 09:21:56
第一、确保物料灭菌彻底，灭菌前一定要完全溶解，严禁出现块状和颗粒状，灭菌时间和温度一定要足！
第二、仔细检查罐内，确保干净、无死角、无物料残渣，并用NaOH溶液煮罐。
第三、检查所有进出罐内的管路，确保干净、无死角、无物料残渣、无泄漏，并连接正确。重点检查接缝、连接口、阀门、空气过滤器等，滤芯做密封性试验，罐内和管路都做保压试验。
第四、确保环境清洁，并对环境消毒，包括地面、地漏等一切有死角的地方。
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2楼2013-04-21 14:48:47
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120300my

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 李腾蛟 at 2013-04-21 14:48:47
第一、确保物料灭菌彻底，灭菌前一定要完全溶解，严禁出现块状和颗粒状，灭菌时间和温度一定要足！
第二、仔细检查罐内，确保干净、无死角、无物料残渣，并用NaOH溶液煮罐。
第三、检查所有进出罐内的管路，确保干 ...

1，物料已过筛，颗粒小，用的是玉米粉和豆粕粉，会不会应为因为比较重沉在罐底没有灭好呢？但为什么第一次和第二次都没有过筛也没有污染呢？
2，罐体大，一些死角，尤其是管路上的无法排查，难道要拆开？
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3楼2013-04-21 18:35:43
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wyj0536

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
给空气滤芯做压降试验，可能空气系统。再就是你的空培的培养基灭菌不彻底？豆粕粉融好后再过滤到发酵罐中
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金钱远比你想象的重要的多。
4楼2013-04-21 20:46:55
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良民

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
120300my: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2013-04-22 09:22:25
新买的500L发酵罐，前两次发酵无问题，第三次第四次开始染菌，于是做了空培，也还是会染菌，到16h后ph开始迅速下降
前两次无问题，后面开始染菌，一般来说空气的可能性较大。建议重新对空气过滤器进行灭菌并确保吹干。引起染菌的可能性太多太多，过滤器击穿、灭菌不彻底、蒸汽压力温度过低、出现死角……
总的来说染菌问题千差万别，原因只能一一排查。祝楼主好运。
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5楼2013-04-22 01:27:46
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你好啊淡淡

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
120300my: 金币+1 2013-04-22 09:22:32
灭灭滤芯吧   可能是滤芯的问题
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6楼2013-04-22 08:10:59
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书枫2010

木虫 (正式写手)
管道 空气 底物 彻底灭一边菌
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7楼2013-04-22 17:21:26
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李腾蛟

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 120300my at 2013-04-21 18:35:43
1，物料已过筛，颗粒小，用的是玉米粉和豆粕粉，会不会应为因为比较重沉在罐底没有灭好呢？但为什么第一次和第二次都没有过筛也没有污染呢？
2，罐体大，一些死角，尤其是管路上的无法排查，难道要拆开？...

排查污染源本来就是一件枯燥的事，不但要认真、细心，还不能怕麻烦！对于死角，必须逐一清理，一个都不能留。管道内清理不到就用蒸汽冲。
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8楼2013-04-22 20:50:22
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120300my

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 李腾蛟 at 2013-04-22 20:50:22
排查污染源本来就是一件枯燥的事，不但要认真、细心，还不能怕麻烦！对于死角，必须逐一清理，一个都不能留。管道内清理不到就用蒸汽冲。...

嗯，谢谢提醒
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9楼2013-04-22 21:48:59
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