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请问什么植物干扰载体效果比较好
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 请问大家哪个植物干扰载体效果比较好..之前想用表达载体构建一个..但是那个载体死活切不开.. 因此想换一个干扰载体..请各位大神推荐一下.. 顺便请问我那个pBI121载体切不开是什么问题呢..原来用TAKARA的酶SacI和BamHI.. 后来换NEB的HiFi酶..按说明书上的体系..37度也切不开..  。。求指教。。 先谢谢大家了。。 |
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michaelwuqingyu
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【答案】应助回帖
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cecilyn: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-20 21:04:46
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这两种酶对甲基化都不敏感，一般应该不会有问题。 你确定你的载体正确么？ 最好用35S 启动子上的引物测一下序。有很多从别人拿过来的载体和map对不上。 另外你质粒提取应该没有问题吧，如果有酒精污染之类的会影响酶切。 RNAi干扰载体用Gateway的方法构建容易一些，现在可能很少有人用酶切连接的老方法构建RNAi载体了。不知道你要往什么植物里转？如果水稻 可以用pANDA 系列 vector。如果双子叶植物用pK7GWIWG不错。 |
2楼2013-04-20 10:43:19
3楼2013-04-20 21:10:30
michaelwuqingyu
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4楼2013-04-21 02:38:07
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