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luo584988339

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于液相色谱使用的问题,请各位大侠指教一下

我最近在做漆酶降解多环芳烃芘的液相色谱定量分析,但是在反应一段时间以后它的峰面积反而增加,或者没有什么变化,有没有可能它的降解产物保留时间和它接近,峰重叠了,它的保留时间有十几分钟,我的流动相比例不能再设大了,我的流动相选的是乙腈和水,多环芳烃是溶解在1:1的异辛烷和正己醇中,请问有没有什么解决的办法。
(2)我的初始浓度比较大,峰面积有7千多,这个会不会也有影响,如果要稀释的话是用我的溶剂稀释比较好还是用乙腈稀释比较好呢?最佳的出峰面积是不是应该控制在1000以下啊~~~
以下附上芘降解的可能产物结构图

芘降解的产物图.jpg
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by luo584988339 at 2013-04-20 14:36:00
恩恩,那可不可能改变一下流动相的pH值会有分离的效果呢...

可以,你还可以改变一下流动相的比例   你用的什么色谱柱啊?现在什么分析条件?
Observationisthebestteacher.
8楼2013-04-20 14:51:59
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by luo584988339 at 2013-04-20 17:25:57
是洗脱能力弱更有利于分离物质么...

流动相的洗脱能力弱一些 可以保证样品与固定相发生充分的相互作用,有助于分离
Observationisthebestteacher.
12楼2013-04-20 17:27:01
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普通回帖

谢春芳

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你把流速调小试一试,如果是峰重叠的话就会有用的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
天高任我行
2楼2013-04-20 00:03:45
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yadxych

银虫 (小有名气)

致癌的呀,做实验小心啊
Hovery
3楼2013-04-20 09:56:00
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
峰面积确实有些大了,你稀释一下,用流动相稀释,浓度太大的话,峰展宽比较严重,可能会把两个峰变成一个峰
Observationisthebestteacher.
4楼2013-04-20 10:19:25
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luo584988339

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yadxych at 2013-04-20 09:56:00
致癌的呀,做实验小心啊

恩啊,我们做的实验试剂都是有毒的,我就想着早日做完,不然都不知道吸了多少有毒物质
5楼2013-04-20 14:35:06
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luo584988339

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 2120100604 at 2013-04-20 10:19:25
峰面积确实有些大了,你稀释一下,用流动相稀释,浓度太大的话,峰展宽比较严重,可能会把两个峰变成一个峰

恩恩,那可不可能改变一下流动相的pH值会有分离的效果呢
6楼2013-04-20 14:36:00
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luo584988339

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 谢春芳 at 2013-04-20 00:03:45
你把流速调小试一试,如果是峰重叠的话就会有用的

我设的还比较小了,只有0.8,主要是设的太小的话保留时间会特别长
7楼2013-04-20 14:37:35
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坐标系石头忆

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 2120100604 at 2013-04-20 14:51:59
可以,你还可以改变一下流动相的比例   你用的什么色谱柱啊?现在什么分析条件?...

我的色谱柱是C18,具体我也不清楚是哪种,最大吸收波长是238nm,流动相是乙腈和水,比例是70:30,柱温是30摄氏度,我是想改成乙腈和缓冲溶液试一下,看看有没有效果,
去留随意,请记住自己想要成为的样子,看更广阔的世界,藏远方与梦想于心
9楼2013-04-20 14:58:18
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2120100604

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★
luo584988339: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-22 12:03:49
引用回帖:
9楼: Originally posted by 坐标系石头忆 at 2013-04-20 14:58:18
我的色谱柱是C18,具体我也不清楚是哪种,最大吸收波长是238nm,流动相是乙腈和水,比例是70:30,柱温是30摄氏度,我是想改成乙腈和缓冲溶液试一下,看看有没有效果,...

可以把水换成缓冲溶液,具体用多少比例,多少ph你要查阅一下文献,另外,乙腈的洗脱能力比甲醇强很多,你可以试试把乙腈换成甲醇,看看效果,还有可以降低一下有机相的比例,这样流动相的洗脱能力要弱一些,有助于实现两种物质的分离,如果真有讲解产物的话,这样有可能分开
Observationisthebestteacher.
10楼2013-04-20 15:08:08
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