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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于液相色谱使用的问题，请各位大侠指教一下
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luo584988339

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于液相色谱使用的问题，请各位大侠指教一下

我最近在做漆酶降解多环芳烃芘的液相色谱定量分析，但是在反应一段时间以后它的峰面积反而增加，或者没有什么变化，有没有可能它的降解产物保留时间和它接近，峰重叠了，它的保留时间有十几分钟，我的流动相比例不能再设大了，我的流动相选的是乙腈和水，多环芳烃是溶解在1:1的异辛烷和正己醇中，请问有没有什么解决的办法。
（2）我的初始浓度比较大，峰面积有7千多，这个会不会也有影响，如果要稀释的话是用我的溶剂稀释比较好还是用乙腈稀释比较好呢？最佳的出峰面积是不是应该控制在1000以下啊~~~
以下附上芘降解的可能产物结构图

芘降解的产物图.jpg
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1楼 2013-04-19 20:15:06
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by luo584988339 at 2013-04-20 14:36:00
恩恩，那可不可能改变一下流动相的pH值会有分离的效果呢...

可以，你还可以改变一下流动相的比例   你用的什么色谱柱啊？现在什么分析条件？
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Observationisthebestteacher.
8楼2013-04-20 14:51:59
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by luo584988339 at 2013-04-20 17:25:57
是洗脱能力弱更有利于分离物质么...

流动相的洗脱能力弱一些 可以保证样品与固定相发生充分的相互作用，有助于分离
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Observationisthebestteacher.
12楼2013-04-20 17:27:01
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普通回帖

谢春芳

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你把流速调小试一试，如果是峰重叠的话就会有用的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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天高任我行
2楼2013-04-20 00:03:45
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yadxych

银虫 (小有名气)
致癌的呀，做实验小心啊
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Hovery
3楼2013-04-20 09:56:00
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
峰面积确实有些大了，你稀释一下，用流动相稀释，浓度太大的话，峰展宽比较严重，可能会把两个峰变成一个峰
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Observationisthebestteacher.
4楼2013-04-20 10:19:25
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luo584988339

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yadxych at 2013-04-20 09:56:00
致癌的呀，做实验小心啊

恩啊，我们做的实验试剂都是有毒的，我就想着早日做完，不然都不知道吸了多少有毒物质
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5楼2013-04-20 14:35:06
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luo584988339

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 2120100604 at 2013-04-20 10:19:25
峰面积确实有些大了，你稀释一下，用流动相稀释，浓度太大的话，峰展宽比较严重，可能会把两个峰变成一个峰

恩恩，那可不可能改变一下流动相的pH值会有分离的效果呢
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6楼2013-04-20 14:36:00
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luo584988339

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 谢春芳 at 2013-04-20 00:03:45
你把流速调小试一试，如果是峰重叠的话就会有用的

我设的还比较小了，只有0.8，主要是设的太小的话保留时间会特别长
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7楼2013-04-20 14:37:35
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坐标系石头忆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 2120100604 at 2013-04-20 14:51:59
可以，你还可以改变一下流动相的比例   你用的什么色谱柱啊？现在什么分析条件？...

我的色谱柱是C18，具体我也不清楚是哪种，最大吸收波长是238nm，流动相是乙腈和水，比例是70:30，柱温是30摄氏度，我是想改成乙腈和缓冲溶液试一下，看看有没有效果，
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去留随意，请记住自己想要成为的样子，看更广阔的世界，藏远方与梦想于心
9楼2013-04-20 14:58:18
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2120100604

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
luo584988339: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-22 12:03:49
引用回帖:
9楼: Originally posted by 坐标系石头忆 at 2013-04-20 14:58:18
我的色谱柱是C18，具体我也不清楚是哪种，最大吸收波长是238nm，流动相是乙腈和水，比例是70:30，柱温是30摄氏度，我是想改成乙腈和缓冲溶液试一下，看看有没有效果，...

可以把水换成缓冲溶液，具体用多少比例，多少ph你要查阅一下文献，另外，乙腈的洗脱能力比甲醇强很多，你可以试试把乙腈换成甲醇，看看效果，还有可以降低一下有机相的比例，这样流动相的洗脱能力要弱一些，有助于实现两种物质的分离，如果真有讲解产物的话，这样有可能分开
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Observationisthebestteacher.
10楼2013-04-20 15:08:08
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