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lijh1234

木虫 (小有名气)

[求助] RT-PCR、western blot检测所需细胞数及细胞培养板的选择 已有1人参与

本人要做原代细胞的培养,一种干细胞,貌似比较难养,目前只查到其在培养板中培养成功的文献,而且存活时间也不长,7-10天左右,数目也不多,就5-10个克隆,每个克隆细胞在20-40左右。

本人的实验室,做了细胞培养后想检测细胞内的几种蛋白的表达及其mRNA的情况,需要RT-PCR、western blot,但怕细胞数量不够,不知道做这2种检测的话,至少需要多少细胞数呢??

再者,各种不同的细胞培养板、培养皿、培养瓶的区别是什么,请指教!!!
我知道的一点就是,不同的细胞培养板、培养皿、培养瓶,细胞长满后所得细胞数目不一样。但是他们的使用用途来说有什么不同呢?
我这个实验是在不同的体外干预下检测干细胞的增殖情况,如果数目够的话还想测mRNA和蛋白,这样的话用哪种培养器皿比较好呢?

非常感谢!!!
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lijh1234

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ujsyangyong at 2013-04-16 08:05:09
培养板、培养皿以及培养瓶都可以用来培养细胞,本质上没有太大区别,关键是看你的实验目的,如果是做增殖实验,肯定是首选培养板,可以酶标仪读数。对于提取RNA或者蛋白,肯定是选择培养皿方便细胞收集。培养瓶比较 ...

谢谢!
我想再问下,原代接种到培养瓶或者培养皿的话,大概接种密度至少是多少才行呢?
4楼2013-04-17 10:25:55
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