应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化后细菌，酶切验证都不出现条带如图所示，这是什么原因，求大神指点？
121/2返回列表12下一页
查看: 1553  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wmhye

金虫 (小有名气)

[求助] 转化后细菌，酶切验证都不出现条带如图所示，这是什么原因，求大神指点？

转化后细菌菌挑单菌落培养，提质粒跑电泳条带都正确，但是酶切验证都不出现条带如图所示，这是什么原因，求大神指点？

质粒电泳



酶切电泳
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
爱海洋，更爱生物
1楼 2013-04-13 21:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先PCR自已的片段，看看有没有插入进去
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmhye
星陈代谢
2楼2013-04-13 22:01:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

留小保

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wmhye: 金币+10, ★★★很有帮助, 绝对是同一批的，酶切了3个小时，那下次酶切把时间减少些看看，谢谢了 2013-04-14 21:32:17
看第二张图像是切的时间太长了，验证的时候一般切1-2个小时就足够了，时间久了就切碎了会出现模糊条带，还有可能就是你酶切验证的跟转化的是一批吗？
赞一下 回复此楼
人生若只如初见 何事秋风悲画扇
3楼2013-04-14 00:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定酶、buffer什么的没有问题吗？
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmhye
4楼2013-04-14 00:54:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmhye

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-14 00:54:10
确定酶、buffer什么的没有问题吗？

我特定验证了一下酶，没有问题的。。。谢谢了
赞一下 回复此楼
爱海洋，更爱生物
5楼2013-04-14 21:33:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmhye

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by kx444555 at 2013-04-13 22:01:24
先PCR自已的片段，看看有没有插入进去

我是先PCR验证的，然后再是提质粒酶切的。。。谢谢
赞一下 回复此楼
爱海洋，更爱生物
6楼2013-04-14 21:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yiloutingyu

铜虫 (小有名气)
你能确定你用的酶就能切开你的东西吗？ 还有就是如果你的片段上有你用的酶的酶切位点的话切出来的片段也不一样，意思是说酶会把你的片段也切开。所以建议你先查查你的序列，看看有什么样的酶切位点。再找合适的酶切。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmhye
7楼2013-04-14 21:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aeo22

木虫 (正式写手)
哇塞，酶切切烂了，要是我就直接扔了，应该假的
要么你用酶多了？
要么你切久了？
菌落PCR的话也有假的啊，你用牙签或者枪头在培养基上点一下菌，前一天涂板铺在培养基表面的插入片段就很可能带进去你PCR反应体系里面咯
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmhye
8楼2013-04-15 01:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmhye

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by yiloutingyu at 2013-04-14 21:53:20
你能确定你用的酶就能切开你的东西吗？ 还有就是如果你的片段上有你用的酶的酶切位点的话切出来的片段也不一样，意思是说酶会把你的片段也切开。所以建议你先查查你的序列，看看有什么样的酶切位点。再找合适的酶切 ...

谢谢了
回复此楼
爱海洋，更爱生物
9楼2013-04-15 21:36:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmhye

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by aeo22 at 2013-04-15 01:25:24
哇塞，酶切切烂了，要是我就直接扔了，应该假的
要么你用酶多了？
要么你切久了？
菌落PCR的话也有假的啊，你用牙签或者枪头在培养基上点一下菌，前一天涂板铺在培养基表面的插入片段就很可能带进去你PCR反应体系 ...

哦！这样啊，我用酶和质粒分别是1.5和7微升
赞一下 回复此楼
爱海洋，更爱生物
10楼2013-04-15 21:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wmhye 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-19 9/450 2026-03-20 12:33 by lature00
[考研] 317求调剂 +4 申子申申 2026-03-19 8/400 2026-03-20 11:20 by 申子申申
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +3 lemonzzn 2026-03-17 4/200 2026-03-20 11:04 by lemonzzn
[考研] 271材料工程求调剂 +7 .6lL 2026-03-18 7/350 2026-03-20 09:10 by xingguangj
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-03-18 5/250 2026-03-20 09:00 by ZHANG0tao
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭