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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化后细菌，酶切验证都不出现条带如图所示，这是什么原因，求大神指点？
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wmhye

金虫 (小有名气)

[求助] 转化后细菌，酶切验证都不出现条带如图所示，这是什么原因，求大神指点？

转化后细菌菌挑单菌落培养，提质粒跑电泳条带都正确，但是酶切验证都不出现条带如图所示，这是什么原因，求大神指点？

质粒电泳



酶切电泳
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爱海洋，更爱生物
1楼 2013-04-13 21:19:58
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aeo22

木虫 (正式写手)
哇塞，酶切切烂了，要是我就直接扔了，应该假的
要么你用酶多了？
要么你切久了？
菌落PCR的话也有假的啊，你用牙签或者枪头在培养基上点一下菌，前一天涂板铺在培养基表面的插入片段就很可能带进去你PCR反应体系里面咯
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wmhye
8楼2013-04-15 01:25:24
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先PCR自已的片段，看看有没有插入进去
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wmhye
星陈代谢
2楼2013-04-13 22:01:24
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留小保

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wmhye: 金币+10, ★★★很有帮助, 绝对是同一批的，酶切了3个小时，那下次酶切把时间减少些看看，谢谢了 2013-04-14 21:32:17
看第二张图像是切的时间太长了，验证的时候一般切1-2个小时就足够了，时间久了就切碎了会出现模糊条带，还有可能就是你酶切验证的跟转化的是一批吗？
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人生若只如初见 何事秋风悲画扇
3楼2013-04-14 00:26:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定酶、buffer什么的没有问题吗？
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmhye
4楼2013-04-14 00:54:10
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