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ckk1987

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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-04-11 11:04:37
我每天做PCR都会重新做逆转录的!因为cDNA在-20度条件下有不能保存很久!...

cDNA可以保存很久的在-20,主要是你的体系可以优化一下,条件也可以优化一下,内参P出来不是说明反转录就完全没问题,因为内参的条件很宽泛,另外给个建议你的体系可以小一点,20就足够了
22楼2013-04-11 13:15:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ckk1987(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-10 08:46:56
ckk1987: 金币+1 2013-04-10 08:55:41
ckk1987: 金币+1 2013-04-10 12:22:06
你后面的PCR体系是25μl, 10×buffer怎么是5ul?
有没有做证对照(P内参基因)?此外,反转录时候的RNA需要定量,因为反应中RNA太多或者太少都会影响逆转录的效果。你说的估算,是在逆转录的时候加了大致多少μg的RNA呢?
2楼2013-04-10 02:26:57
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ckk1987

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3楼2013-04-10 08:44:20
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4楼2013-04-10 08:49:51
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