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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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11楼2013-04-10 19:45:15
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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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12楼2013-04-10 19:50:00
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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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13楼2013-04-10 19:53:04
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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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14楼2013-04-10 20:02:01
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-04-10 20:02:01
我想问你一下,怎么跟Mark比对,电泳图上一共是有三个条带的,是看最亮的那个条带吗?...

看三个条带加起来的浓度,Marker的条带都是有说明的,你看自己哪个浓度最亮的那个条带跟Marker最亮的那条接近,就用那个浓度来估算原始RNA的浓度。祝实验顺利。
15楼2013-04-10 21:29:06
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-04-10 19:45:15
dNTP是2.5mM的,至于引物我已经做了两种浓度,一个是稀释10倍,一个稀释了50倍,效果都不怎么样?还有一个问题,PCR试剂盒上的反应总体系是50ul,如果我要降低到25ul,那对应每一个的添加量能纯粹的减半吗?...

dNTP的终浓度是200μM,你加的量是50μl体系。引物终浓度做一般是0.1-0.5μM。如果用25μl体系,各种成分的终浓度需要一样,也就是相对于50μl体系都减半。
16楼2013-04-11 02:05:35
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shui_hanliu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-04-10 19:50:00
做了内参,我的内参是beta-actin!但也没有出来······...

那就可能是你的cDNA没做好,你要重新逆转录一下
17楼2013-04-11 09:35:53
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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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18楼2013-04-11 11:03:39
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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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19楼2013-04-11 11:04:37
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ckk1987

禁虫 (正式写手)

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20楼2013-04-11 11:05:53
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