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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ckk1987

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cicelyzh

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

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11楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-04-10 19:45:15
dNTP是2.5mM的,至于引物我已经做了两种浓度,一个是稀释10倍,一个稀释了50倍,效果都不怎么样?还有一个问题,PCR试剂盒上的反应总体系是50ul,如果我要降低到25ul,那对应每一个的添加量能纯粹的减半吗?...

dNTP的终浓度是200μM,你加的量是50μl体系。引物终浓度做一般是0.1-0.5μM。如果用25μl体系,各种成分的终浓度需要一样,也就是相对于50μl体系都减半。
16楼2013-04-11 02:05:35
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cicelyzh

实习版主

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
ckk1987(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-10 08:46:56
ckk1987: 金币+1 2013-04-10 08:55:41
ckk1987: 金币+1 2013-04-10 12:22:06
你后面的PCR体系是25μl, 10×buffer怎么是5ul?
有没有做证对照(P内参基因)?此外,反转录时候的RNA需要定量,因为反应中RNA太多或者太少都会影响逆转录的效果。你说的估算,是在逆转录的时候加了大致多少μg的RNA呢?
2楼2013-04-10 02:26:57
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ckk1987

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3楼2013-04-10 08:44:20
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ckk1987

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4楼2013-04-10 08:49:51
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