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gissingtan

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help

最近在做巢式PCR,请问有经验的师兄师姐,你们第一次PCR的产物需要做什么处理才作为第二次PCR的模板?
我听师姐说直接切胶,放-20℃过夜,12000rpm离心10min,取上清液做模板,不知是否合理,我自己尝试了一下,跑胶检测没有条带。
我想请教:
1、第一次PCR产物是怎么处理,再作为第二次PCR的模板
2、我做的方法是否正确,如果正确,为什么检测没有条带
谢谢大家了
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___戊_

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接去pcr产物  稀释100-500倍然后当dna用 直接加
9楼2013-04-08 09:17:28
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zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最近正打算做抑制性消减杂交,要用到巢式PCR,可以交流一下。
生而不息,奋斗不止!
2楼2013-04-07 17:19:27
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gissingtan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangquan084 at 2013-04-07 17:19:27
最近正打算做抑制性消减杂交,要用到巢式PCR,可以交流一下。

好的~请问你知道巢式PCR具体操作过程吗?
3楼2013-04-07 17:33:20
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zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不太清楚,最近也刚在学。只知道原理!
生而不息,奋斗不止!
4楼2013-04-07 17:48:15
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