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st.nova2012

新虫 (小有名气)

[求助] 求助一下细胞冻存的方法 已有1人参与

P2代 Hepa1-6细胞,
胰酶消化后离心,倾去培养液,加入2ml冻存液。同学说吹打使cell悬浮均匀,但我技术不行(新手一枚),吹的时候全是气泡,所以没吹,改在涡旋震荡器上涡旋了约3秒,感觉比较均匀了。
问题是涡旋会不会对cell造成伤害?
我这样做的冻存cell还可以用吗?
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以将一部分细胞解冻后进行观察,漩涡的震荡比较激烈,对细胞还是有一定的伤害的
2楼2013-04-01 10:28:24
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st.nova2012

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 星星的眼睛 at 2013-04-01 10:28:24
你可以将一部分细胞解冻后进行观察,漩涡的震荡比较激烈,对细胞还是有一定的伤害的

是不是可以说  不能用涡旋的方法来悬浮细胞?
3楼2013-04-01 12:59:39
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用这种办法来解冻肯定会有伤害的
4楼2013-04-01 15:46:40
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st.nova2012

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-04-01 15:46:40
你用这种办法来解冻肯定会有伤害的

解冻肯定用枪去吹的,冻存是不是也只能吹,不能涡旋
5楼2013-04-02 10:53:32
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失踪的夏天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
怎么会气泡多呢?
   消化离心去上清,再加1ml或者2ml或者5ml的培养基,看你的细胞量,吸管先捏住排气再伸到液面靠下的地方,吸取吹打,我每次的气泡很少呀!
    均匀后加入DMSO,然后分装到冻存管里。就算有气泡也吸不到。
生活在此处,当下就是今生。
6楼2013-04-02 22:23:24
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st.nova2012

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 失踪的夏天 at 2013-04-02 22:23:24
怎么会气泡多呢?
   消化离心去上清,再加1ml或者2ml或者5ml的培养基,看你的细胞量,吸管先捏住排气再伸到液面靠下的地方,吸取吹打,我每次的气泡很少呀!
    均匀后加入DMSO,然后分装到冻存管里。就算有气泡 ...

我是新手啊,每次很小心很小心都还是有气泡
7楼2013-04-03 15:51:19
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zhengyuanhui

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

8楼2014-08-22 19:19:54
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