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eggskin

木虫 (小有名气)

[求助] 测定酶活,同一个样品同样的标准,我测得就比别人偏低,不知道为什么?

最近做一个酶的酶活测定,以前是做分析的,但没测过酶活,最近做了好多批检测了,但是我测得一般都几十万左右,让另一个人(以前做过这个的)测,就测100多万,现在也不知道谁的正确了,想问下高手,酶活测定过程中哪些细节需要注意啊?指导我下,谢谢!尤其测过的!
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
eggskin: 金币+2 2013-04-01 10:55:54
我以前也遇到过,你们两个用移液器做还是移液管做?有无对照品?
感觉酶活测定误差就是大,同一个人做两次,重复性也不是很好。
3楼2013-03-29 18:58:15
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
eggskin: 金币+2, 有帮助 2013-04-01 10:55:46
酶促反应有反馈抑制,所以稀释倍数不同,计算得到释放产物的总量也不同。同理,反应时间久了,到后期释放产物就慢了,换算到每分钟释放量就少了。

反应体系不同。

酶促反应的反应温度不同,酶促速率不同。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2013-03-29 15:18:00
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rndxmc

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
eggskin: 金币+1 2013-04-01 10:56:34
温度,时间,用量,提取的步骤,有的试剂是否一样。酶活力对测量的条件比较敏感。仔细检查一下有什么不同。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-03-30 14:12:31
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巧克力123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
容器清洗干净程度、取样均匀等也要考虑
5楼2013-03-30 21:12:11
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