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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 测定酶活，同一个样品同样的标准，我测得就比别人偏低，不知道为什么？
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eggskin

木虫 (小有名气)

[求助] 测定酶活，同一个样品同样的标准，我测得就比别人偏低，不知道为什么？

最近做一个酶的酶活测定，以前是做分析的，但没测过酶活，最近做了好多批检测了，但是我测得一般都几十万左右，让另一个人（以前做过这个的）测，就测100多万，现在也不知道谁的正确了，想问下高手，酶活测定过程中哪些细节需要注意啊？指导我下，谢谢！尤其测过的！
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1楼 2013-03-29 09:52:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
eggskin: 金币+2, ★有帮助 2013-04-01 10:55:46
酶促反应有反馈抑制，所以稀释倍数不同，计算得到释放产物的总量也不同。同理，反应时间久了，到后期释放产物就慢了，换算到每分钟释放量就少了。

反应体系不同。

酶促反应的反应温度不同，酶促速率不同。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2013-03-29 15:18:00
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
eggskin: 金币+2 2013-04-01 10:55:54
我以前也遇到过，你们两个用移液器做还是移液管做？有无对照品？
感觉酶活测定误差就是大，同一个人做两次，重复性也不是很好。
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3楼2013-03-29 18:58:15
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rndxmc

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
eggskin: 金币+1 2013-04-01 10:56:34
温度，时间，用量，提取的步骤，有的试剂是否一样。酶活力对测量的条件比较敏感。仔细检查一下有什么不同。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-03-30 14:12:31
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巧克力123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
容器清洗干净程度、取样均匀等也要考虑
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5楼2013-03-30 21:12:11
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cooljojomi

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
标准曲线做的是否准确？
酶溶液的浓度一定要合适，显色的吸光值一定要在线性范围内。
反应体系在混合之前都要先充分预热，控制好反应时间很重要。
要耐心，以前我测的时候也很费了时间的呢。
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6楼2013-04-01 09:03:32
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cooljojomi

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

补充一下，一定要多做几个平行哦
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7楼2013-04-01 09:05:02
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