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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱仪不出峰是怎么回事
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gxf2337575

金虫 (著名写手)

独孤求败

[求助] 高效液相色谱仪不出峰是怎么回事

具体情况如下：
1. 0.2mg/mL 胆甾醇(二氯甲烷溶解)
测试条件：C18柱 波长210纳米，流动相100%甲醇，流速1.0mL/min，柱温30℃，只有一个二氯甲烷的溶剂峰；走了一个二氯甲烷的，结果发现是二氯甲烷中的杂质出峰。改用其他溶剂如甲醇、乙醇、乙腈，在相同的条件下，均未出峰；
2. 换用阿维菌素，0.2mg/mL （甲醇溶解）
C18柱 波长245nm,流动相甲醇：水=92:8，流速1.0mL/min,柱温30℃，依旧未出峰，之前师姐做的在10分钟左右就出了。
不知道问题出哪了，请各位帮帮忙
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学会面对
1楼 2013-03-22 13:34:08
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children9986

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gxf2337575: 金币+3 2013-03-27 20:19:26
不出峰的问题原因有：
1、样品没有进入色谱柱（）。
2、样品有问题。
3、检测器有问题（能量低）
4、柱子问题。（样品进入柱子后无法被洗出）
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6楼2013-03-25 15:47:54
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gxf2337575: 金币+5 2013-03-25 15:15:41
1. 首先检查一下方法设定是否正确。如波长等等。（我就遇到过这样的问题，波长设错了，根本没有峰的。有时流动相配错了，被测物也不会洗脱出来的）
2. 样品有没有问题。
总之，应该从最基本的东西查起。我们有时出问题就出在那些我们认为没有问题的地方上。
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有因有果
4楼2013-03-24 14:02:17
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gxf2337575

金虫 (著名写手)

独孤求败
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuting_li at 2013-03-24 14:02:17
1. 首先检查一下方法设定是否正确。如波长等等。（我就遇到过这样的问题，波长设错了，根本没有峰的。有时流动相配错了，被测物也不会洗脱出来的）
2. 样品有没有问题。
总之，应该从最基本的东西查起。我们有时出 ...

波长自己做过紫外，和文献报道相符；样品熔点，红外，旋光，核磁数据均与文献报道一致，也没有问题。
可能是检测器灵敏度变差了，我的样品胆固醇吸收较弱，胆固醇的测试条件很成熟；但是阿维菌素应该吸收是比较强的，毕竟有个共轭双键，但是也没出峰，阿维菌素师姐做了几十次了，测试条件没有问题。
过几天工程师就来了，到时候问题应该能解决
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学会面对
5楼2013-03-25 15:13:41
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jxyuan126

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gxf2337575: 金币+3 2013-03-27 20:19:15
应该是你的柱子的问题，柱效太低了。把色谱柱冲洗一下吧。或者是你的检测池脏了。
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学海无涯
7楼2013-03-25 16:26:11
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