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gxf2337575

金虫 (著名写手)

独孤求败

[求助] 高效液相色谱仪不出峰是怎么回事

具体情况如下:
1. 0.2mg/mL 胆甾醇(二氯甲烷溶解)
测试条件:C18柱 波长210纳米,流动相100%甲醇,流速1.0mL/min,柱温30℃,只有一个二氯甲烷的溶剂峰;走了一个二氯甲烷的,结果发现是二氯甲烷中的杂质出峰。改用其他溶剂如甲醇、乙醇、乙腈,在相同的条件下,均未出峰;
2. 换用阿维菌素,0.2mg/mL (甲醇溶解)
C18柱 波长245nm,流动相甲醇:水=92:8,流速1.0mL/min,柱温30℃,依旧未出峰,之前师姐做的在10分钟左右就出了。
不知道问题出哪了,请各位帮帮忙
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学会面对
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gxf2337575: 金币+5 2013-03-25 15:15:41
1. 首先检查一下方法设定是否正确。如波长等等。(我就遇到过这样的问题,波长设错了,根本没有峰的。有时流动相配错了,被测物也不会洗脱出来的)
2. 样品有没有问题。
总之,应该从最基本的东西查起。我们有时出问题就出在那些我们认为没有问题的地方上。
有因有果
4楼2013-03-24 14:02:17
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gxf2337575

金虫 (著名写手)

独孤求败

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuting_li at 2013-03-24 14:02:17
1. 首先检查一下方法设定是否正确。如波长等等。(我就遇到过这样的问题,波长设错了,根本没有峰的。有时流动相配错了,被测物也不会洗脱出来的)
2. 样品有没有问题。
总之,应该从最基本的东西查起。我们有时出 ...

波长自己做过紫外,和文献报道相符;样品熔点,红外,旋光,核磁数据均与文献报道一致,也没有问题。
可能是检测器灵敏度变差了,我的样品胆固醇吸收较弱,胆固醇的测试条件很成熟;但是阿维菌素应该吸收是比较强的,毕竟有个共轭双键,但是也没出峰,阿维菌素师姐做了几十次了,测试条件没有问题。
过几天工程师就来了,到时候问题应该能解决
学会面对
5楼2013-03-25 15:13:41
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children9986

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gxf2337575: 金币+3 2013-03-27 20:19:26
不出峰的问题原因有:
1、样品没有进入色谱柱()。
2、样品有问题。
3、检测器有问题(能量低)
4、柱子问题。(样品进入柱子后无法被洗出)
6楼2013-03-25 15:47:54
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jxyuan126

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gxf2337575: 金币+3 2013-03-27 20:19:15
应该是你的柱子的问题,柱效太低了。把色谱柱冲洗一下吧。或者是你的检测池脏了。
学海无涯
7楼2013-03-25 16:26:11
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