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大风吹

银虫 (小有名气)

[求助] ChIP结果的Realtime检测

最近在做ChIP  实验室传统做法是最后做个常规PCR 跑胶鉴定 我想学习一下用Realtime的方式检测结果 是要做个标准曲线什么的吧 具体怎么分组 操作 哪位知道 望不吝赐教 非常感谢
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coo.coo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用已知浓度的样品做连续的5个梯度稀释,做出标准曲线。模板浓度很高的需要稀释,将稀释的样品加入你配置的MIX里面,做三个重复就好了。
7楼2013-04-01 13:52:53
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hy_sandra

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-03-22 12:39:16
大风吹: 金币+18, ★★★很有帮助 2013-06-15 14:46:27
基本上與傳統的一樣,有negative control(通常是IgG),有positive control(通常是histone),有input control。不需要做標準曲線,因為最後是要用input作內參,然後在樣本間作比較。只是比較的算法比較不一樣,可以上invitrogen的官網,內有教學

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
科研是無止盡的
2楼2013-03-18 22:08:18
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大风吹

银虫 (小有名气)

感谢  我就是想做标准曲线的那种  希望做过的多多指教
3楼2013-03-22 10:22:13
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大风吹

银虫 (小有名气)

Invitrogen官网上没找到教学 要不你发个链接给我 还有谁知道双deltaCT法 的模板怎么计算 就是realtime 时模板加多少 谢谢
4楼2013-03-28 18:10:47
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