24小时热门版块排行榜    

查看: 1519  |  回复: 8

大风吹

银虫 (小有名气)

[求助] ChIP结果的Realtime检测

最近在做ChIP  实验室传统做法是最后做个常规PCR 跑胶鉴定 我想学习一下用Realtime的方式检测结果 是要做个标准曲线什么的吧 具体怎么分组 操作 哪位知道 望不吝赐教 非常感谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hy_sandra

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-03-22 12:39:16
大风吹: 金币+18, ★★★很有帮助 2013-06-15 14:46:27
基本上與傳統的一樣,有negative control(通常是IgG),有positive control(通常是histone),有input control。不需要做標準曲線,因為最後是要用input作內參,然後在樣本間作比較。只是比較的算法比較不一樣,可以上invitrogen的官網,內有教學

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
科研是無止盡的
2楼2013-03-18 22:08:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大风吹

银虫 (小有名气)

感谢  我就是想做标准曲线的那种  希望做过的多多指教
3楼2013-03-22 10:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大风吹

银虫 (小有名气)

Invitrogen官网上没找到教学 要不你发个链接给我 还有谁知道双deltaCT法 的模板怎么计算 就是realtime 时模板加多少 谢谢
4楼2013-03-28 18:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大风吹

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hy_sandra at 2013-03-18 22:08:18
基本上與傳統的一樣,有negative control(通常是IgG),有positive control(通常是histone),有input control。不需要做標準曲線,因為最後是要用input作內參,然後在樣本間作比較。只是比較的算法比較不一樣,可以上 ...

能不能告诉我 模板怎么加 就是模板量要不要一致 怎么才算一致 谢谢
5楼2013-04-01 12:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
大风吹(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-27 20:32:27
http://zh.invitrogen.com/site/cn ... /chip-analysis.html
这个是invitrogen网站上的。
模板加一样的体积就可以了吧?
6楼2013-04-01 13:08:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coo.coo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用已知浓度的样品做连续的5个梯度稀释,做出标准曲线。模板浓度很高的需要稀释,将稀释的样品加入你配置的MIX里面,做三个重复就好了。
7楼2013-04-01 13:52:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大风吹

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by coo.coo at 2013-04-01 13:52:53
用已知浓度的样品做连续的5个梯度稀释,做出标准曲线。模板浓度很高的需要稀释,将稀释的样品加入你配置的MIX里面,做三个重复就好了。

Input IgG Anti-目的蛋白 如果这三组需要的稀释梯度不一样  那要怎么计算呢
8楼2013-04-01 14:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hy_sandra

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2013-05-31 22:46:16
???????:
5?: Originally posted by ??紵 at 2013-04-01 12:30:42
?????????? ???????? ???????????????? ?????????? лл...

???????DNA????????????????????5ug??????????DNA???????50ul???2ul??real time PCR??Ct????e????????????

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
科研是無止盡的
9楼2013-04-01 21:09:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大风吹 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +3 hit_aiot 2026-03-01 5/250 2026-03-02 07:48 by 得鹿梦鱼111
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
信息提示
请填处理意见