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zpplovesea

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC外标法怎么计算? 已有1人参与

大家好,我用HPLC测含量A,先用一系列对照品A做标准曲线,横坐标用浓度表示还是用质量表示啊?纵坐标用的是峰面积。之后又用HPLC测待测品中A的含量,在走出来的图中直接积分得出面积,根据这个积分出来的面积在标准曲线上直接读含量吗?这个含量是我进样20微升的总含量,还是单位微升的含量?实在是闹不懂啊!请各位指教?如能给个实例介绍也好啊!
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樱花下微笑

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 多谢指教! 2013-03-17 12:00:07
先利用对照品做出标准曲线,横坐标用对照品浓度,纵坐标用峰面积,得出标准曲线后,再用待测品进行试验,同样得出峰面积,在标准曲线上对应找出浓度值,就得到了待测品的浓度

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2楼2013-03-16 21:03:01
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-03-18 13:36:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by 樱花下微笑 at 2013-03-16 21:03:01
先利用对照品做出标准曲线,横坐标用对照品浓度,纵坐标用峰面积,得出标准曲线后,再用待测品进行试验,同样得出峰面积,在标准曲线上对应找出浓度值,就得到了待测品的浓度

此为正解,在整个过程中不管是标准品还是待测品进样量一定要保持一致

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-03-17 10:15:51
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zpplovesea

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 樱花下微笑 at 2013-03-16 21:03:01
先利用对照品做出标准曲线,横坐标用对照品浓度,纵坐标用峰面积,得出标准曲线后,再用待测品进行试验,同样得出峰面积,在标准曲线上对应找出浓度值,就得到了待测品的浓度

那如果是以对照品质量做很坐标的话,是不是测出来待测品峰面积是那进样20微升的总质量?我不太明白啊,还有待测峰那个峰面积百分比是不是没用?
4楼2013-03-17 10:43:46
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zpplovesea

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 星星的眼睛 at 2013-03-17 10:15:51
此为正解,在整个过程中不管是标准品还是待测品进样量一定要保持一致...

如果我对照品是以相同浓度不同体积进样做的标准曲线,以进样质量做横坐标,峰面积做纵坐标,那待测品进样20微升,然后待测品的峰面积是不是就用直接积分得出来的峰面积,然后根据这个峰面积从标准曲线上得出的质量是这20微升的总质量?
5楼2013-03-17 10:47:25
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1 2013-03-18 13:36:28
引用回帖:
5楼: Originally posted by zpplovesea at 2013-03-17 10:47:25
如果我对照品是以相同浓度不同体积进样做的标准曲线,以进样质量做横坐标,峰面积做纵坐标,那待测品进样20微升,然后待测品的峰面积是不是就用直接积分得出来的峰面积,然后根据这个峰面积从标准曲线上得出的质量 ...

折算成浓度计算的更多,因为方便
6楼2013-03-17 11:16:44
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chushou

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主得多看文献呐!~
7楼2013-03-18 08:45:54
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merry1987

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-03-18 13:36:33
用你的方法可以大概知道对照品应该配置的浓度,再进行外标法测定试验。具体方法如下:
1.配置一定浓度的对照A溶液(浓度为你确定的),双样双针;计算F=称样量/A峰面积/稀释倍数,得到F均值;
2.配置一定浓度的待测样品溶液,积分得出A的峰面积,再用此峰面积*F*稀释倍数/待测样品的称样量*100%即得到待测样品溶液中A的含量。
不知是不是你想要的答案。
别人怎么看你,和你无关,做好自己。
8楼2013-03-18 12:36:04
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辣笔v小新

荣誉版主 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖


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xiaoxiao270: 金币+1 2013-03-18 13:36:38
做标准曲线,横坐标用浓度或质量都可以的...虫友要理解“外标法”的精髓,不可拘泥!!!
自强不息,日新月异
9楼2013-03-18 13:35:53
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张超199005

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同样做标准曲线,如果对一个浓度的溶液,多次进样但是峰面积波动很大的情况下,应该怎么办?谢谢
10楼2014-07-07 21:02:00
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