| 查看: 767 | 回复: 1 | |||
LiJie861027新虫 (初入文坛)
|
[求助]
双荧光素酶报告实验
|
| 双荧光素酶报告实验是怎么回事情？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有197人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于信号转导研究方面的问题
已经有7人回复
- 世界著名的生物技术公司
已经有32人回复
- NaK ATP 酶活性实验做不出数据
已经有8人回复
- 怎么用ATP试剂盒测微生物ATP？马上要做自己的课题了，可遇到了拦路虎
已经有23人回复
- 关于2011中俄（NSFC-FRBR）合作项目初审结果的通告
已经有6人回复
- 荧光素酶是不是很容易失活啊？
已经有8人回复
- miRNA双荧光报告基因实验筛选靶基因及细胞功能学研究资料---miR21文献
已经有106人回复
- 有关稳转NF-kB萤光素酶报告基因的问题
已经有5人回复
- 荧光素酶报告基因的内参质粒选择
已经有3人回复
- 【求助】有人在做焦磷酸测序么？希望得到大虾的帮助
已经有13人回复
- 【求助/交流】哪位童鞋有荧光素酶基因
已经有5人回复
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
LiJie861027: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-03-13 15:34:21
感谢参与，应助指数 +1
LiJie861027: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-03-13 15:34:21
|
简单的说，这个实验系统可以研究基因调控，或者说启动子活性。基因何时 ON/OFF？其行使功能的效率如何？基因可以被某个药物switched ON/OFF? 这个系统里一般有两个载体，一个载体上有萤火虫荧光素酶Firefly luciferase基因，这个载体一般会连接上你想要检测的基因或者说启动子；另外一个载体上有海肾荧光素酶Renilla luciferase基因，一般这个载体上还连接有超强启动子，作为内对照基因，默认这个载体的表达水平也就是海肾荧光素酶基因的表达水平在所有细胞，或者细胞在不同的环境下，都是一样的。这个就是萤火虫荧光素酶-海肾荧光素酶双报告基因检测方法，PROMEGA和一些国产的厂家都已经有这个试剂盒。另外，现在应该还有其他的荧光素酶系统可以选择。 实验步骤大概是： 1.先加入Luciferin检测Firefly luciferase 活性(经2s延迟后读数)。 2.加入Stop&Glo终止Firefly 反应，同时开始检测Renilla luciferase 活性(经2s延迟后读数) 。 3.实验的结果以Firefly和Renilla活性的比值来衡量。 这个实验需要用可以检测化学发光的仪器来做。因为化学发光的信号比较微弱和不稳定，所以这个实验一定要做好各种对照！ |
2楼2013-03-12 20:47:11
30