应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白体液中加甘油和蔗糖的作用是什么？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 3081  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

湖畔狂想

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白体液中加甘油和蔗糖的作用是什么？ 已有3人参与

蛋白提取液中有加甘油的，也有加蔗糖的。
请问他们的作用是什么，区别是什么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-10 11:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rice1007

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2013-03-10 13:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rice1007 at 2013-03-10 13:41:22
我个人觉得，这两个东东主要是密度大，上样电泳时起到沉降作用的哟，不至于蛋白上样时飘起来。

蛋白比他俩沉吧。。。
回复此楼
3楼2013-03-10 13:51:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rice1007

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-11 09:00:32
本帖内容被屏蔽
4楼2013-03-10 13:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-03-11 09:00:43
主要是维持一定的渗透压，有助于破碎细胞。你提取蛋白的时候是在native条件下把，一般要求冰上操作，蔗糖和甘油在低温下对蛋白有一定的保护作用，稳定蛋白结构。甘油有类似膜脂的结构，所以在分离纯化大分子膜蛋白的时候往往加甘油的效果更好。
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-10 15:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rice1007 at 2013-03-10 13:55:01
没有啊，我是搞水稻，我一般蛋白电泳都是加甘油（20%），起沉降作用，跑DNA我一般都是加蔗糖。...

我试试
回复此楼
6楼2013-03-10 15:35:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-10 15:21:20
主要是维持一定的渗透压，有助于破碎细胞。你提取蛋白的时候是在native条件下把，一般要求冰上操作，蔗糖和甘油在低温下对蛋白有一定的保护作用，稳定蛋白结构。甘油有类似膜脂的结构，所以在分离纯化大分子膜蛋白的 ...

为什么是稳定蛋白结构呢，提取蛋白时，不是要断开二硫键、氢键等次级键，破坏掉它的结构吗？
这是步骤：
将材料加液氮研碎成粉末状，加入少许PVP-40及含50mMTris-HCl(pH7．8)、10％v/v加甘油、1mM EDTANa2、lmM PMSF和2％v/v巯基乙醇的抽提缓冲液I继续匀浆。
沉淀再用含有100mM磷酸缓冲液(pH7．1)、10％v/v甘油、200mM KCl、2mM MgS04.7H2O、1mM EDTANa2、2％w/V CHAPs、1mM PMSF和2％v/v巯基乙醇的抽提缓冲液Ⅱ悬浮起来。
轻轻摇匀30min后，加入7M Urea、2M硫脲、3mM DTT在室温继
续摇匀30min。再22400rpm离心3 min，取上清与上次所得上清液汇合。
对上清液中的总蛋白质进行酚抽提，加入等体积Tris饱和酚，振荡30min。再离心3min，15000rpm，4℃。取酚相再加入5倍体积0.1M乙酸胺(甲醇配制)，4℃静置至出现沉淀为止。离心30min，15000rpm，4℃。用丙酮(含13mMDTT)洗涤两次。最后，-40℃冰冻干燥蛋白质成干粉状。
求指教！
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-10 17:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rice1007

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2013-03-10 22:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 湖畔狂想 at 2013-03-10 17:19:18
为什么是稳定蛋白结构呢，提取蛋白时，不是要断开二硫键、氢键等次级键，破坏掉它的结构吗？
这是步骤：
将材料加液氮研碎成粉末状，加入少许PVP-40及含50mMTris-HCl(pH7．8)、10％v/v加甘油、1mM EDTANa2、lmM  ...

感觉你的方法是要上2D吧。我说的是总体上的目的。有些方法是不加尿素、DTT、CHAPS这些东西的。
就你的这个方法，加甘油的目的是能更充分的提取膜蛋白。因为膜蛋白是镶嵌在脂双层里面，一定的甘油能给膜蛋白一个相对稳定的微环境。
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-11 01:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-11 01:18:21
感觉你的方法是要上2D吧。我说的是总体上的目的。有些方法是不加尿素、DTT、CHAPS这些东西的。
就你的这个方法，加甘油的目的是能更充分的提取膜蛋白。因为膜蛋白是镶嵌在脂双层里面，一定的甘油能给膜蛋白一个相 ...

嗯，是要上2D。
能说说你用的方法吗？
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-11 08:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 湖畔狂想 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 数一英一271专硕（085401）求调剂，可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 394求调剂 +3 好事多磨静候佳� 2026-03-26 5/250 2026-03-28 14:24 by 唐沐儿
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 一志愿上海理工能源动力（085800）310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭