应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白体液中加甘油和蔗糖的作用是什么？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 3100  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

湖畔狂想

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白体液中加甘油和蔗糖的作用是什么？ 已有3人参与

蛋白提取液中有加甘油的，也有加蔗糖的。
请问他们的作用是什么，区别是什么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-10 11:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rice1007

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2013-03-10 13:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rice1007 at 2013-03-10 13:41:22
我个人觉得，这两个东东主要是密度大，上样电泳时起到沉降作用的哟，不至于蛋白上样时飘起来。

蛋白比他俩沉吧。。。
回复此楼
3楼2013-03-10 13:51:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rice1007

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-11 09:00:32
本帖内容被屏蔽
4楼2013-03-10 13:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-03-11 09:00:43
主要是维持一定的渗透压，有助于破碎细胞。你提取蛋白的时候是在native条件下把，一般要求冰上操作，蔗糖和甘油在低温下对蛋白有一定的保护作用，稳定蛋白结构。甘油有类似膜脂的结构，所以在分离纯化大分子膜蛋白的时候往往加甘油的效果更好。
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-10 15:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rice1007 at 2013-03-10 13:55:01
没有啊，我是搞水稻，我一般蛋白电泳都是加甘油（20%），起沉降作用，跑DNA我一般都是加蔗糖。...

我试试
回复此楼
6楼2013-03-10 15:35:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-10 15:21:20
主要是维持一定的渗透压，有助于破碎细胞。你提取蛋白的时候是在native条件下把，一般要求冰上操作，蔗糖和甘油在低温下对蛋白有一定的保护作用，稳定蛋白结构。甘油有类似膜脂的结构，所以在分离纯化大分子膜蛋白的 ...

为什么是稳定蛋白结构呢，提取蛋白时，不是要断开二硫键、氢键等次级键，破坏掉它的结构吗？
这是步骤：
将材料加液氮研碎成粉末状，加入少许PVP-40及含50mMTris-HCl(pH7．8)、10％v/v加甘油、1mM EDTANa2、lmM PMSF和2％v/v巯基乙醇的抽提缓冲液I继续匀浆。
沉淀再用含有100mM磷酸缓冲液(pH7．1)、10％v/v甘油、200mM KCl、2mM MgS04.7H2O、1mM EDTANa2、2％w/V CHAPs、1mM PMSF和2％v/v巯基乙醇的抽提缓冲液Ⅱ悬浮起来。
轻轻摇匀30min后，加入7M Urea、2M硫脲、3mM DTT在室温继
续摇匀30min。再22400rpm离心3 min，取上清与上次所得上清液汇合。
对上清液中的总蛋白质进行酚抽提，加入等体积Tris饱和酚，振荡30min。再离心3min，15000rpm，4℃。取酚相再加入5倍体积0.1M乙酸胺(甲醇配制)，4℃静置至出现沉淀为止。离心30min，15000rpm，4℃。用丙酮(含13mMDTT)洗涤两次。最后，-40℃冰冻干燥蛋白质成干粉状。
求指教！
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-10 17:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rice1007

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2013-03-10 22:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 湖畔狂想 at 2013-03-10 17:19:18
为什么是稳定蛋白结构呢，提取蛋白时，不是要断开二硫键、氢键等次级键，破坏掉它的结构吗？
这是步骤：
将材料加液氮研碎成粉末状，加入少许PVP-40及含50mMTris-HCl(pH7．8)、10％v/v加甘油、1mM EDTANa2、lmM  ...

感觉你的方法是要上2D吧。我说的是总体上的目的。有些方法是不加尿素、DTT、CHAPS这些东西的。
就你的这个方法，加甘油的目的是能更充分的提取膜蛋白。因为膜蛋白是镶嵌在脂双层里面，一定的甘油能给膜蛋白一个相对稳定的微环境。
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-11 01:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-11 01:18:21
感觉你的方法是要上2D吧。我说的是总体上的目的。有些方法是不加尿素、DTT、CHAPS这些东西的。
就你的这个方法，加甘油的目的是能更充分的提取膜蛋白。因为膜蛋白是镶嵌在脂双层里面，一定的甘油能给膜蛋白一个相 ...

嗯，是要上2D。
能说说你用的方法吗？
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-11 08:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 湖畔狂想 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求助071001调剂！！！ +3 黄守松 2026-04-05 4/200 2026-04-05 21:01 by barlinike
[考研] 301求调剂 +5 细胞相关蛋白 2026-04-02 9/450 2026-04-05 20:14 by lys0704
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +7 多多爱吃汉堡 2026-04-04 7/350 2026-04-05 19:47 by 福农资环_环境基
[考研] 一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-04-04 12/600 2026-04-05 19:04 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿同济大学323分（080500）求调剂 +8 yikeniu 2026-04-01 8/400 2026-04-05 18:15 by cql1109
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +13 lllllos 2026-04-04 14/700 2026-04-04 23:34 by lqwchd
[考研] [调剂信息]085408光电信息 求调剂 总分291分数一英一 +3 iz11az 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:09 by 蓝云思雨
[考研] 085600，320分求调剂 +14 大馋小子 2026-04-04 15/750 2026-04-04 16:27 by 无际的草原
[考研] 求调剂：085600材料与化工，考材科基，总分319 +21 678lucky 2026-03-31 26/1300 2026-04-04 16:22 by dongzh2009
[考研] 一志愿0817化学工程与技术，求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 08工科，295，接受跨专业调剂 +8 lmnlzy 2026-03-30 8/400 2026-04-03 13:08 by nalakaiqi
[考研] 专硕 351 086100 也是考的材科基 本科也是材料 +8 202451007219 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:50 by 蓝云思雨
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭