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多抗制备问题
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87115wh
木虫
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虫号: 1264649
[交流]
多抗制备问题
我想做一个多抗,自己纯化的重组蛋白带有GST标签,但是公司说不负责切标签,如果直接做,可能会有杂带,我想问下影响大吗?我也不知道自己的天然样本中是否含有和GST标签序列一样的蛋白。求各位大侠指点。
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2013-03-08 09:21:31
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genda_cto
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自然是有影响的.GST,一个26KD的蛋白,打到动物体内会产生大量针对GST的抗体。如果你的蛋白里面含有GST标签,那么你制备的抗血清、多抗用什么方法检测,用什么方法纯化?不过这些都可以解决,要纯化出针对你目的蛋白的単特异性多克隆抗体还是办得到的。但下一个问题,你以含有GST的目的蛋白作为免疫原,GST与目的蛋白几乎是等量的,能保证针对目的蛋白的抗体浓度和效价吗?这个就未知了。末了,问题出在哪,也就不得而知。
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6楼
2013-03-08 12:41:16
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lihuan0525
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那就用把GST先除去好了,
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2楼
2013-03-08 09:32:49
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2楼
:
Originally posted by
lihuan0525
at 2013-03-08 09:32:49
那就用把GST先除去好了,
怎么除去,能说的详细一点吗?实验室还没有切GST的酶
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3楼
2013-03-08 10:24:29
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lihuan0525
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3楼
:
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87115wh
at 2013-03-08 10:24:29
怎么除去,能说的详细一点吗?实验室还没有切GST的酶...
用专门出GST标签的一种亲和介质纯化出去啊,
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4楼
2013-03-08 10:31:19
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