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87115wh

木虫 (小有名气)

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虫号: 1264649

[交流] 多抗制备问题

我想做一个多抗，自己纯化的重组蛋白带有GST标签，但是公司说不负责切标签，如果直接做，可能会有杂带，我想问下影响大吗？我也不知道自己的天然样本中是否含有和GST标签序列一样的蛋白。求各位大侠指点。

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1楼 2013-03-08 09:21:31

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genda_cto

新虫 (初入文坛)

应助: 4 (幼儿园)
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虫号: 2232848

★
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自然是有影响的.GST，一个26KD的蛋白，打到动物体内会产生大量针对GST的抗体。如果你的蛋白里面含有GST标签，那么你制备的抗血清、多抗用什么方法检测，用什么方法纯化？不过这些都可以解决，要纯化出针对你目的蛋白的単特异性多克隆抗体还是办得到的。但下一个问题，你以含有GST的目的蛋白作为免疫原，GST与目的蛋白几乎是等量的，能保证针对目的蛋白的抗体浓度和效价吗？这个就未知了。末了，问题出在哪，也就不得而知。